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制限酵素処理を行うと分子量の大きなバンドが現れる トピック削除
No.2693-TOPIC - 2009/01/21 (水) 12:32:25 - ヤママ
プラスミドにSac1を作用させたところ目的分子量のバンドのほかに,
分子量の大きなバンドが現れました。
コントロールとして制限酵素処理を行っていないプラスミドを流しましたが,目的分子量より小さい所に(コイルだと思われる)バンドが見えているだけでした。

(補足)
*プラスミドはSac1では1か所しか切れないはずです。
*他のプラスミドでSac1処理を行ったときは,このような現象は起こらず,普通に切れていました。


大きなバンドが現れる原因の可能性を教えてください。
 
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(無題) 削除/引用
No.2693-3 - 2009/01/21 (水) 16:03:53 - おお
オープンサーキュラー

(無題) 削除/引用
No.2693-2 - 2009/01/21 (水) 12:44:28 - ザンギ
環状のプラスミドと直鎖状のプラスミドは、同じ塩基数でも易動度が違います。
ものによっては環状のほうが易動度が大きく、見かけ上の分子サイズが小さくなります。

制限酵素処理を行うと分子量の大きなバンドが現れる 削除/引用
No.2693-1 - 2009/01/21 (水) 12:32:25 - ヤママ
プラスミドにSac1を作用させたところ目的分子量のバンドのほかに,
分子量の大きなバンドが現れました。
コントロールとして制限酵素処理を行っていないプラスミドを流しましたが,目的分子量より小さい所に(コイルだと思われる)バンドが見えているだけでした。

(補足)
*プラスミドはSac1では1か所しか切れないはずです。
*他のプラスミドでSac1処理を行ったときは,このような現象は起こらず,普通に切れていました。


大きなバンドが現れる原因の可能性を教えてください。

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