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お礼 削除/引用 No.2539-7 - 2008/12/29 (月) 20:01:08 - むずー 参考になりました。 みなさんありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2539-6 - 2008/12/23 (火) 14:10:31 - おお 6xHISもポリクロのほうがいいかと思っています。 でもあまり意識して比較していません。

(無題) 削除/引用 No.2539-5 - 2008/12/23 (火) 08:37:36 - T-2 ここが参考になるかもしれません。 http://www.sigma-aldrich.co.jp/sigma/Protein/FLAG/first.htm 1XFlagと3XFlagでは検出感度はざっと１０倍、 3xFlagと6xHisは１００倍なんで、1XFlagと6xHisなら １０倍くらい1XFlagのほうが感度が高いってことみたいです。

(無題) 削除/引用 No.2539-4 - 2008/12/23 (火) 07:54:38 - 名無し それは使用する抗体の質と活性によるものなので、そういう比較は難しいとおもいます。イメージ的にはポリクロならばFlagの方がいろいろな部位を認識する多様な抗体が出来ていてよさそうな気もしますが。

(無題) 削除/引用 No.2539-3 - 2008/12/23 (火) 00:38:56 - A Anti-FLAGは私も使ったことが無いのでわからないですね。 > Hisについては、QIAGENが１時、抗体の広告をバンバン出していて、 > その感度についても明記していました。ngオーダーだったとおもいます。 私はSigma、Invitrogenのanti-His抗体をWBで使ったことがありますが、ngオーダーの感度が得られたことはないです。発現タンパク質によってはCBBでもなんとか検出できる量である10ngオーダーでも検出出来ないこともありました（もちろんWBですから他の要因も絡んでいたかもしれません）。良いAnti-Hisのメーカーがあったら何方か教えてください。

(無題) 削除/引用 No.2539-2 - 2008/12/21 (日) 16:47:36 - おお Hisについては、QIAGENが１時、抗体の広告をバンバン出していて、 その感度についても明記していました。ngオーダーだったとおもいます。 FLAGは分かりませんがもうちょっと高いようなきがします。 ただ、検出方法や検出するサンプルの非特異のバンドの出現のしかた で大きく左右されると思いますので、簡単に感度をいうのは 難しいかと思います。

ウェスタンブロッティングについて 削除/引用 No.2539-1 - 2008/12/21 (日) 15:23:03 - むずー FLAG×1タグとHis×6タグは、ウェスタンブロッティングでの検出感度がどれ位違うものなのでしょうか？ 実際に両方を経験された方は、どの程度の差を感じられましたか？

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