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ベクターを変えると不溶化タンパクが可溶化? トピック削除
No.2525-TOPIC - 2008/12/19 (金) 04:32:48 - ベクター
現在、すべての既報では不溶化タンパクとして発現すると書いてあるタンパク精製を行っています。
 今回既報とは異なるタンパク発現用ベクターでこのタンパクを発現させると、ソニケーション、遠心後、沈殿と上清をウエスタンでチェックしたところ、目的のタンパクが上清側に認められました。
 ベクターの種類が異なるとタンパクが可溶化することってありうるのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.2525-5 - 2008/12/20 (土) 16:16:39 - ふぇ
ソニケーションの強さによって変わったって話もあります。

(無題) 削除/引用
No.2525-4 - 2008/12/19 (金) 10:45:21 - 中年
上清に来るかどうかは遠心の回転数にも依りますよ。半端にアグってるようなケースだと、超遠心しないと(しても)落ちてこないこともあります。

(無題) 削除/引用
No.2525-3 - 2008/12/19 (金) 08:56:47 - 通りすがり
いくらでもありますね。

いろんなメーカーの広告の宣伝文句を読んでください、
"他のベクターでは可溶化しなかったものが今回の新開発のベクターでは
はじめて可溶化できました!!"
とか言って比較してる写真とか普通に載せてるじゃないですか(笑)。

(無題) 削除/引用
No.2525-2 - 2008/12/19 (金) 06:05:01 - tx
ちょっと的が微妙にはずれているかもしれませんが、pColdとかは分かりやすい例だと思います。

ベクターを変えると不溶化タンパクが可溶化? 削除/引用
No.2525-1 - 2008/12/19 (金) 04:32:48 - ベクター
現在、すべての既報では不溶化タンパクとして発現すると書いてあるタンパク精製を行っています。
 今回既報とは異なるタンパク発現用ベクターでこのタンパクを発現させると、ソニケーション、遠心後、沈殿と上清をウエスタンでチェックしたところ、目的のタンパクが上清側に認められました。
 ベクターの種類が異なるとタンパクが可溶化することってありうるのでしょうか?

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