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培養細胞の上清回収のやり方
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No.2509-TOPIC - 2008/12/16 (火) 11:31:33 -
とーしろ
実験初心者です。非常に恥ずかしい質問なのですが、
96穴で培養細胞を刺激し48時間後に上清回収を行う実験を予定しています。
最後に回収するときには96穴から直接メディウムを吸い出して回収するのでしょうか?それとも全量を別のチューブに移して遠心分離してから回収するのが正しいのでしょうか?
お願いします。
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No.2509-5 - 2008/12/17 (水) 06:24:33 -
おお
cell debrisが除けていればいいと考えればOKではないでしょうか。
やり方は決まった方法があるかと言うと、多分人それぞれだと
おもいます。また、強い遠心で落ちるのでしたら、細胞外マトリクス
や、なにか非常に大きなもの(多糖とか、重合したものとか、)に
強く結合している可能性もありますし、見るもの次第とも
いえるかもしれません。
(無題)
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No.2509-4 - 2008/12/16 (火) 13:39:32 - Pumpkin
遠心分離するときのgとサイトカインの物性を考えれば、おのずと答えがでるはずです。
(無題)
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No.2509-3 - 2008/12/16 (火) 13:11:13 -
とーしろ
ありがとうございます。
素人考えなのですが、上清中のサイトカインを測定したいのですが、遠心により産生されたサイトカインがそこにたまり、実際より薄くなったり、測定できなくなったりという心配は不要でしょうか?
(無題)
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No.2509-2 - 2008/12/16 (火) 11:45:23 - 11
普通は全量を別のチューブに移して
低速で遠心分離してから回収したほうが
死んだ細胞の塊とか取り除けるのでやりますね。
ただ96穴とかでチューブにいちいち移してやってると相当面倒くさいんで
普通はプレート用の遠心機でプレートごとspinして
上澄みの上のほうをとる感じでやってます。
培養細胞の上清回収のやり方
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No.2509-1 - 2008/12/16 (火) 11:31:33 -
とーしろ
実験初心者です。非常に恥ずかしい質問なのですが、
96穴で培養細胞を刺激し48時間後に上清回収を行う実験を予定しています。
最後に回収するときには96穴から直接メディウムを吸い出して回収するのでしょうか?それとも全量を別のチューブに移して遠心分離してから回収するのが正しいのでしょうか?
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