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ありがとうございます。 削除/引用 No.2491-7 - 2008/12/16 (火) 18:11:16 - にゃん 名無しのゲノムさん ありがとうございます＞＜ 山中先生の講演を聞かれたんですか。うらやましいです。 私も実際に聞いてみたいです。 IRESで最初に試したのは知らなかったです。 そのことについて論文には書かれていなかったので、 突然2Aペプチドが出てきて疑問に思っていたので すっきりしました！！ こうやって世界中が先を競って研究をしている中で、 どこよりも早く結果を出さなきゃいけないというのは とても大変だし、プッレッシャーがかかると思います。 でもその中で、結果を出している山中先生、その研究室のメンバーはとてもすばらしいなと思います。 本当がんばってほしいと改めて思いました！！ ありがとうございました！！

2Aペプチド 削除/引用 No.2491-6 - 2008/12/16 (火) 11:30:37 - 名無しのゲノム 山中先生の講演でしゃべっておられましたが、IRESで 3因子(Oct3/4、Klf4、Sox2)をつないで発現ベクターを 構築したところ、うまくいかなかったそうです。 IRESではどうしても後ろ側の遺伝子の翻訳効率が落ちて しまうそうで。 そこで、2Aペプチドを用いると、3因子が1つのポリペプ チドとして発現されますので、上記の問題をクリアでき たそうです。 ですが、3因子をつなぐ順番も検討が必要だったそうで、 苦労されたのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.2491-5 - 2008/12/13 (土) 20:13:14 - にゃん ありがとうございます＞＜ その後自分でも調べてみたところ、 2Aペプチドは自己開裂ペプチドであり、 ポリプロテインを切断する機能があるみたいで、 3因子(Oct3/4、Klf4、Sox2)をこれでつなぐことで、 それぞれを得ることができる、 感じみたいです！ 用語の使い方とか間違ってたら教えてください＞＜

(無題) 削除/引用 No.2491-4 - 2008/12/12 (金) 22:35:05 - D 聞いた話だから不確かで申し訳ないですが 確かAの2アミノ酸でFusionすることで TFした細胞内の酵素で分解されて 2つのタンパクになるんじゃなかったかな 2アミノ酸で済むからIRESより発現効率も良いだろうし Fusion proteinもWesternすると検出されるようですが ウイルスが小さなサイズの遺伝情報で 複数の必要タンパクを作る能力の一つを利用した方法でしょうね

ありがとうございます。 削除/引用 No.2491-3 - 2008/12/12 (金) 18:02:11 - にゃん 早速のお返事ありがとうございます＞＜ なるほど。 でも、それは他のウイルスのペプチドだとできないんですかね？？ 2Aself-cleaving(←これもよくわからないんですが)のペプチドを使う利点というのは、 細胞に入りやすいとかそういった理由もあるんでしょうか？？

(無題) 削除/引用 No.2491-2 - 2008/12/12 (金) 17:52:11 - 通りすがり ウイルス自体は使ってないです。 ウイルス由来のペプチドです。 あれを入れると1種類のpromoterから 複数のタンパクを発現させられるから使ってるだけです。

プラスミド　iPS細胞 削除/引用 No.2491-1 - 2008/12/12 (金) 17:44:08 - にゃん iPS細胞がプラスミドで誘導できたという論文を見てるんですけど、 なんであの口蹄病のウイルスを使ったのかがわからなくて；； 教えてください＞＜

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