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NOx測定 トピック削除
No.2422-TOPIC - 2008/12/01 (月) 18:00:05 - rx811
NOxの測定市販キットを探しています。
培養内皮細胞の培養液中のNOの代謝産物であるNOxを測定したのですが、以前Cayman chemicalの市販キット(LDH method)でやってみたのですが検出感度以下で測定できませんでした。
どなたか感度のよい市販キットなどの情報をお持ちの方はいらっしゃらないでしょうか?
宜しくお願いいたします。
 
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メディウム量 削除/引用
No.2422-2 - 2008/12/06 (土) 23:52:01 - SNO
細胞から産生されるNOxはメディウム中で希釈されるわけです。
ですから、ディッシュにいれるメディウム量を半分にすれば、濃度は2倍になることが予想されます。実際にはそういう訳にはいきませんが、それなりには上がりますよ。

メディウム中での測定ですから、NADPHの影響はあまり気にする必要はないでしょう。普通のグリース測定でも対応できます。LDH法を使わなくても、測定は出来るはずです。ただし、フェノールレッドは低濃度のNO測定に影響するので、フェノールレッドなしの培地がよいでしょう。
他に高感度のキットとしては、NO特異性の高い蛍光試薬と反応させるものもありますが、蛍光の読めるプレートリーダーとフィルターが必要になります。

とりあえず、メディウムの量を減らして、インキュベーションの時間を長くして、蓄積量を増やすことをお勧めします。

NOx測定 削除/引用
No.2422-1 - 2008/12/01 (月) 18:00:05 - rx811
NOxの測定市販キットを探しています。
培養内皮細胞の培養液中のNOの代謝産物であるNOxを測定したのですが、以前Cayman chemicalの市販キット(LDH method)でやってみたのですが検出感度以下で測定できませんでした。
どなたか感度のよい市販キットなどの情報をお持ちの方はいらっしゃらないでしょうか?
宜しくお願いいたします。

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