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MG-132の使用法 トピック削除
No.2329-TOPIC - 2008/11/14 (金) 21:44:36 - ひょん
MG-132を用いて細胞培養系に与える影響を調べています。
培養は72時間の系で行っています。
文献に出てくるMG-132の使用法としては、
pre-culture30分というのが主ですが、
72時間培養するような系であっても30分でよいのでしょうか?

ちなみに今行っているやり方は、

ヒト単核球細胞
細胞をFCSfreeで2hr starvation
MG-132入れてで30分culture
PBSで洗って条件を振った培地で培養72時間

というやり方ですが、いかがでしょう?
 
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(無題) 削除/引用
No.2329-3 - 2008/11/15 (土) 01:35:54 - おお
>[Re:1] ひょんさんは書きました :
> MG-132を用いて細胞培養系に与える影響を調べています。
> 培養は72時間の系で行っています。
> 文献に出てくるMG-132の使用法としては、
> pre-culture30分というのが主ですが、
> 72時間培養するような系であっても30分でよいのでしょうか?

何が見たいかによって違います。
自分の見たい事についてよく考えて見てください。

(無題) 削除/引用
No.2329-2 - 2008/11/14 (金) 22:04:01 - ぶほっ
MGなんて可逆的阻害剤なので、72 hという長期的にみるような実験だと難しいですよ。
やっぱ72時間入れっぱなしでないと。

てか死んじゃうと思いますけどね。細胞を72時間MG処理だと。

もちろんいれっぱなしの場合には半減期を考慮に入れて途中幾度かの培地への追加も必要かと思いますし。

てかもう少しacuteの段階での勝負にしかあまり用いられませんよね。

MG-132の使用法 削除/引用
No.2329-1 - 2008/11/14 (金) 21:44:36 - ひょん
MG-132を用いて細胞培養系に与える影響を調べています。
培養は72時間の系で行っています。
文献に出てくるMG-132の使用法としては、
pre-culture30分というのが主ですが、
72時間培養するような系であっても30分でよいのでしょうか?

ちなみに今行っているやり方は、

ヒト単核球細胞
細胞をFCSfreeで2hr starvation
MG-132入れてで30分culture
PBSで洗って条件を振った培地で培養72時間

というやり方ですが、いかがでしょう?

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