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(無題) 削除/引用 No.2322-11 - 2008/11/17 (月) 09:59:12 - よっしー 「生着した白血病細胞の中にドナー由来の細胞が含まれる」と言うことは PCRでも確認できると思いますが， 「生着したこの白血病細胞がドナー由来の細胞である」と言うことは， ~さんのおっしゃるとおり，マーカー遺伝子を入れたほうが良いと思います．

ありがとうございます 削除/引用 No.2322-10 - 2008/11/17 (月) 09:54:56 - taka ＞ぽすどく様 学会前のお忙しいところお返事ありがとうございました。 大変参考になりました。 ご紹介いただいたリンク先にプライマー配列、サイクル条件など書いてありますので、とりあえずそれで試してみたいと思います。また結果はここで報告させていただきます。 本当にありがとうございました。 それでは寒くなってきましたので、学会出張、お気をつけて。

Zfy-1 削除/引用 No.2322-9 - 2008/11/17 (月) 08:53:43 - ぽすどく 　他の方もおっしゃっているとおり、Y染色体上の遺伝子に対するPCRです。 　ラボのノートを見れば条件がわかるのですが、明日から学会出張で、２日ほど留守にしてしまいます。今、記憶でわかるのは遺伝子の名前Zfy-1だけです。しかし、 http://wwwsoc.nii.ac.jp/jsar/jrd/jpage/vol48/480102.html を見つけました。 　このウェブサイトのプライマーや条件が私が使っていたものと同じかどうかわからず、確信を持って勧めることは出来ないのですが、参考にしてください。 　確か、論文もあったと思います。（ひょっとしたら、上記ウェブにあるかもしれません） 　もし、これ以上知りたい場合は、また質問してください。学会終了後になりますが、返信できると思います。

ありがとうございます 削除/引用 No.2322-8 - 2008/11/16 (日) 20:14:47 - taka ＞~様 核型判定というのもありですね。委託する方法などもとれますし。 GFPTGと掛け合わせて、そもそも移入する細胞を識別可能にしておくというのもよい方法ですね。 Y染色体が抜け落ちる可能性については考慮しておりませんでした。気をつけたいと思います。 ＞ぽすどく様 ご親切なお申し出をありがとうございました。 レシピエントに発症した白血病から細胞を分離して解析しようと思っていますので、通常のPCRのことが知りたいです。 ご紹介いただけますと大変助かります。

質問 削除/引用 No.2322-6 - 2008/11/15 (土) 04:00:07 - ぽすどく 　PCRとのことですが、組織上で判断したいのですよね？ 　普通にTubeのPCRでよいのなら、詳細をご紹介できるのですが。（遺伝子名、配列、、PCR条件も）

(無題) 削除/引用 No.2322-5 - 2008/11/14 (金) 12:31:41 - ~ Y染色体を検出できるのはPCR,FISH,核型検定あたりでしょうか？ GFPなどの適当なマーカー遺伝子を細胞に入れておいて、 それを検出するのはいかがでしょうか。 性別に無関係に検出に使えます。 Y染色体とどちらが抜け落ちやすいかが分かりませんが。 異なる系統であれば、polymorphismの違いでも検出できますが、 それを調べて確認するのに手間がかかりますね。

ありがとうございます 削除/引用 No.2322-4 - 2008/11/14 (金) 11:46:27 - taka Y染色体特異的遺伝子をゲノムPCRで検出すればいいですかね。 となると♂の細胞を♀にトランスファーするのがいいですかね。 ♀から♂への逆のトランスファーを検出するのはむずかしいですかね。 FISHは確実な手段ですね。 でも、やったことがないので私にとっては簡便とは言い難くて。。

(無題) 削除/引用 No.2322-3 - 2008/11/14 (金) 11:34:59 - ぶほっ FISHでいいんちゃう？

(無題) 削除/引用 No.2322-2 - 2008/11/14 (金) 10:34:52 - ぶほっ Y chromosome specific geneで…

マウス細胞の♂♀識別法 削除/引用 No.2322-1 - 2008/11/14 (金) 10:23:37 - taka いつもお世話になっています。 マウスの白血病細胞をSCIDマウスに移入する実験を計画しているのですが、SCIDマウスに生着した白血病細胞が確かにドナー由来であるということを確認するのにオスメスの違いを使おうかと思っています。 オスメスの違いというのはPCRかなにかで簡便に調べられるものなのでしょうか。 方法論をご存じのかたがいらっしゃったら教えていただけますと幸いです。

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