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グアニジンによるタンパクの変性 トピック削除
No.2230-TOPIC - 2008/11/03 (月) 21:36:57 - グアニジン
タンパク精製をやっています。
グアニジン+DTTでタンパクを変性させたいのですが、皆さんはこのとき、マグネットスターラーと、ローラー、どちらを使っていますか?
 
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No.2230-4 - 2008/11/07 (金) 00:01:20 - BBB
本質的にはどっちでもいいと思いますが、周りをみるとローテーターでやる人が多いようにおもいます。単にたぶん台数の少ないスターラ−を長く占有するのが気が引けるからでは、とおもいます。

(無題) 削除/引用
No.2230-3 - 2008/11/03 (月) 22:50:55 - グアニジン
すみません。ローテーターのことです。

(無題) 削除/引用
No.2230-2 - 2008/11/03 (月) 22:06:21 - A
「ローラー」の意味が今ひとつはっきりしないのですがローテーターのことですか?

変性ですがわたしは変性バッファーでべレットを溶いた後は静置するだけで特に攪拌はしていません。

もしかしたら以下は必要ないかもしれませんが念のため。
タンパク精製ということですからおそらくHisタグ辺りを使用されているのではと想像していますが、変性してHisタグに付けるまでは問題ないのですが溶出までに変性バッファー系をグアニジンから尿素に代えるのを忘れないでください。グアニジンのままだとSDS-PAGEできませんから(ゲルにのせた時点、溶液が赤くなって浮いてくるため)。これがめんどくさいので私はここのところ変性には尿素しか使っていません。

グアニジンによるタンパクの変性 削除/引用
No.2230-1 - 2008/11/03 (月) 21:36:57 - グアニジン
タンパク精製をやっています。
グアニジン+DTTでタンパクを変性させたいのですが、皆さんはこのとき、マグネットスターラーと、ローラー、どちらを使っていますか?

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