「ローラー」の意味が今ひとつはっきりしないのですがローテーターのことですか?
変性ですがわたしは変性バッファーでべレットを溶いた後は静置するだけで特に攪拌はしていません。
もしかしたら以下は必要ないかもしれませんが念のため。
タンパク精製ということですからおそらくHisタグ辺りを使用されているのではと想像していますが、変性してHisタグに付けるまでは問題ないのですが溶出までに変性バッファー系をグアニジンから尿素に代えるのを忘れないでください。グアニジンのままだとSDS-PAGEできませんから(ゲルにのせた時点、溶液が赤くなって浮いてくるため)。これがめんどくさいので私はここのところ変性には尿素しか使っていません。 |
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