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カラム精製 脱気について トピック削除
No.2188-TOPIC - 2008/10/27 (月) 22:42:29 - マカロン
タンパク質の精製を行う予定で、カラムの準備を進めています。
以前にも少し質問させていただいたのですが、SP-sepharoseの担体(粉末ではなく、ゲル?状のもの)のみを購入し(予算の都合で、他のシステムは購入できなさそうです)、自分で詰めてみるつもりなのですが、GEヘルスケアの説明書を読んでみたところ、脱気については何も書かれていませんでした。イオン交換の樹脂は、脱気が必要ないのでしょうか?もし、行う場合は、何℃で何分程度で行うのでしょうか?煮沸厳禁だとは思うのですが・・。

また、15%イソプロパノールを通してから、平衡化を行うようにありましたが、これは定番なのでしょうか?今まで(といっても、経験はかなり浅いです)、脱気→カラムに詰める→(洗浄)→平衡化という流れで行っていましたので・・。

宜しくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.2188-2 - 2008/10/28 (火) 02:26:47 - 通りすがり
SP-sepharoseを脱気したことはありません.
イソプロパノールもつかわず,普通に水で平衡化してからカラムにつめて
開始バッファで平衡化しています.
Fast flowならポンプを使ってつめたほうがが,
硬く詰まるので分離が良くなります.

カラム精製 脱気について 削除/引用
No.2188-1 - 2008/10/27 (月) 22:42:29 - マカロン
タンパク質の精製を行う予定で、カラムの準備を進めています。
以前にも少し質問させていただいたのですが、SP-sepharoseの担体(粉末ではなく、ゲル?状のもの)のみを購入し(予算の都合で、他のシステムは購入できなさそうです)、自分で詰めてみるつもりなのですが、GEヘルスケアの説明書を読んでみたところ、脱気については何も書かれていませんでした。イオン交換の樹脂は、脱気が必要ないのでしょうか?もし、行う場合は、何℃で何分程度で行うのでしょうか?煮沸厳禁だとは思うのですが・・。

また、15%イソプロパノールを通してから、平衡化を行うようにありましたが、これは定番なのでしょうか?今まで(といっても、経験はかなり浅いです)、脱気→カラムに詰める→(洗浄)→平衡化という流れで行っていましたので・・。

宜しくお願い致します。

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