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マウス採血方法 トピック削除
No.2186-TOPIC - 2008/10/27 (月) 13:25:11 - PK
いつも勉強させていただいています。

マウスの採血方法について質問させてください。
20匹以上のマウスから麻酔なしで全採血(血漿で200uL以上必要)したいのですが、最も早く簡便な方法はどれなのでしょうか?教えてください。

よろしくお願いします。
 
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採血法について 削除/引用
No.2186-11 - 2010/01/27 (水) 20:00:28 - わたsj初心者
できるだけ大量にということであれば、麻酔下に心臓採血か下大静脈採血が良いと思います。慣れればどの方法でも良い、というのは採血に限ったことではありませんが、お好みの方法が良いと思います。私自身は下大静脈採血をしています。

・心臓採血
胸腔を開き心尖部から採血します。針のサイズは25-29Gと個人で好みがあるようです。マウスが死んでしまうと心臓に血液が戻ってこなくなるので、上手く取れない時は焦ります。

・下大静脈採血
腹腔を大きく開き、腸管などを綿棒などで体外へ避けます。マウスの腎臓と下大静脈がきれいに見えるようにします。腎静脈が下大静脈へ流入するあたりに狙いを付けて、下大静脈から採血します。針のサイズはやはり好み次第ですが、私自身はインシュリン注射用の1cc(29G)シリンジを愛用しています。

なお、実験系に支障を来さないのであればシリンジの内筒に少量のヘパリン処置をしておくと、凝固の心配もなく、焦って溶血するほど吸い過ぎることもないので、落ち着いてできますよ。

マウス採血 削除/引用
No.2186-10 - 2010/01/26 (火) 09:38:29 - tomo
マウスからできるだけ多量に採血をする方法をさがしております。
眼底からの採血で多量に採血ができると聞いたことがありますが
どうでしょうか?眼底からの採血は倫理的に認められた方法でしょうか?
なお眼底からの採血を行った論文(できればその方法も書いている)があれば教えていただけないでしょうか?(英文で)どうぞよろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.2186-9 - 2008/10/27 (月) 19:11:42 - AP
麻酔はだめでも、安楽死ならokということなら、頸椎脱臼もいいかもしれません。心臓が止まってしまうと、もたもたしているうちに心臓内でも血液が固まってきてうまくとれないことがありますが、頸椎脱臼は上手にやると、脳死状態になって心臓を動かし続けることができますので(頸椎脱臼は学生時代以来やってませんが)。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.2186-8 - 2008/10/27 (月) 18:24:42 - PK
皆様ありがとうございます

麻酔なしという条件では、マウスを安楽死後、心臓採血を行うのがよさそうですね。もう少し調べてみます。

(無題) 削除/引用
No.2186-7 - 2008/10/27 (月) 16:04:22 - よっしー
麻酔下でしたら,心採血は慣れれば開胸せずに0.8-1mLを
30秒くらいで採血できますが,
麻酔無しではした事がありません.
CO2で安楽殺してからでも,どれくらいの量が採れるか知りませんが,
可能かもしれませんね.
腹部大動脈から採血って事は,安楽死後ですよね.
だとすると心臓からの方が,採血しやすいような気がしますが・・・.
的確なアドバイスができず申し訳ありません.

(無題) 削除/引用
No.2186-6 - 2008/10/27 (月) 16:02:07 - mom-a
>腹部大動脈から採血するという方法もあるみたいですが、こちらはどうでしょうか?

普通は「麻酔下で」腹部大動脈あるいは腹部大静脈から採血することが多いのではないでしょうか。無麻酔で開腹できないですから。

麻酔の影響があって使えないなら、いっそ断頭して採血する方法もありますが、溶血しやすいので注意が必要ですし、血清でなくて血漿だとどうでしょう…途中で凝固してしまう可能性があるので。

CO2での安楽死が可能なら、その後開腹して腹部大動脈からでも構いませんが、心臓が止まっていると採血しずらいので、心臓からの方が良いように思います。

眼底または心臓からの採血は無麻酔で不可能ではないですが、動物倫理上の問題が生じる場合がありますから、事前にしっかり調べておかないと、とったデータが論文や報告書に使えなくなってしまいます。

(無題) 削除/引用
No.2186-5 - 2008/10/27 (月) 15:58:17 - AP
これが参考になると思います。
http://www.kenkyuu.net/cgi-biotech/biotechforum.cgi?mode=view;Code=3633

私は、全採血なら麻酔、開胸して、注射器で心臓からとります。
一回にせいぜい5, 6匹しかやらないのでこれで間に合っています。

開胸の手間を省くなら、体表から心臓に注射針をさしてとる方法がありますが、熟練が必要だし、麻酔なしというのは、動物に必要以上に苦痛を与えることになるのでいかんでしょう。

そう考えると、残る方法は断頭採血ということになるかと思います。よく切れる大きなはさみがあれば出来ないことないですが、専用のギロチンを使えば麻酔なしでも可能だと思います。

(無題) 削除/引用
No.2186-4 - 2008/10/27 (月) 15:33:33 - PK
お返事ありがとうございます。

心採血は行ったことがないのですが、難しくはないのでしょうか?
腹部大動脈から採血するという方法もあるみたいですが、こちらはどうでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2186-3 - 2008/10/27 (月) 14:44:53 - こうじ
200ul保証で必要ならば、面倒だと思わず
CO2で安楽殺して心採血ではだめなのですか?

動物倫理委員会でどう認められているかにもよりますが、
あまりひどい実験をしていると問題になる事もあります。
昔は眼を引きちぎって採血しているラボもありましたが、、、

必要なのが血清でなく血漿ならなおさらだと思いますが?

(無題) 削除/引用
No.2186-2 - 2008/10/27 (月) 13:35:53 - 9
眼底採血だと思います。

マウス採血方法 削除/引用
No.2186-1 - 2008/10/27 (月) 13:25:11 - PK
いつも勉強させていただいています。

マウスの採血方法について質問させてください。
20匹以上のマウスから麻酔なしで全採血(血漿で200uL以上必要)したいのですが、最も早く簡便な方法はどれなのでしょうか?教えてください。

よろしくお願いします。

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