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C2C12細胞の分化培地の交換頻度 トピック削除
No.2182-TOPIC - 2008/10/24 (金) 20:23:03 - マイオ
いつもお世話になっております。

現在、C2C12の分化誘導実験を行っているのですが、少々気になる点がありますのでご存知の方がいらっしゃいましたら、教えていただけないでしょうか?

気になる点といいますのは、分化培地の交換頻度です。
私の使っているC2C12は、分化誘導後、毎日新鮮な培地に交換すると、約4〜5日後に筋管が観察されます。培地の交換を行わない、または頻度を落とすと、分化せず細胞が死んでしまいます。

C2C12を使っている論文を見ますと、分化誘導後、培地を交換しているといった記載が見られませんが、これは私が使用しているC2C12に特異的な現象なのでしょうか?

C2C12で分化誘導をされている方がいらっしゃいましたら、培地の交換頻度等を教えていただければと思います。また、新しく購入するとしたらどこから購入するのがおすすめか教えていただければと思います。

分化誘導培地は、DMEM+2% Horse serumです。
分化させずに維持する場合は、DMEM+10% FBSを使っています。

どうぞよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2182-5 - 2008/10/27 (月) 18:36:43 - マイオ
>C2C12様

どうもありがとうございます。
二日ごとに培地を交換しているとのことですが、その場合、筋管が観察されるのは何日目ぐらいでしょうか?


>SI様

6〜7日で使用出来るというのは、筋管の形成が見られるということでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2182-4 - 2008/10/25 (土) 17:07:25 - SI
僕が使っていた時は・・・

分化をかけた日(day0)、day1、day2、day4、day6と培地を交換していました。この場合、6〜7日で使用できます。

感覚的な話で申し訳ないですが、毎日交換するとやや細いmyotubeが、2日に1回だとやや太いmyotubeが出来る印象があります。

また、分化をかけてから48hくらいは、24時間おきに変えないと、死んでしまう細胞数が多い印象があります。

御参考になれば幸いです

(無題) 削除/引用
No.2182-2 - 2008/10/25 (土) 07:01:48 - C2C12
ウチのラボでは2日(約48時間)ごとに培地を変えてますが、特に問題を感じたことはありません。
ちなみにATCCから購入しました。

C2C12細胞の分化培地の交換頻度 削除/引用
No.2182-1 - 2008/10/24 (金) 20:23:03 - マイオ
いつもお世話になっております。

現在、C2C12の分化誘導実験を行っているのですが、少々気になる点がありますのでご存知の方がいらっしゃいましたら、教えていただけないでしょうか?

気になる点といいますのは、分化培地の交換頻度です。
私の使っているC2C12は、分化誘導後、毎日新鮮な培地に交換すると、約4〜5日後に筋管が観察されます。培地の交換を行わない、または頻度を落とすと、分化せず細胞が死んでしまいます。

C2C12を使っている論文を見ますと、分化誘導後、培地を交換しているといった記載が見られませんが、これは私が使用しているC2C12に特異的な現象なのでしょうか?

C2C12で分化誘導をされている方がいらっしゃいましたら、培地の交換頻度等を教えていただければと思います。また、新しく購入するとしたらどこから購入するのがおすすめか教えていただければと思います。

分化誘導培地は、DMEM+2% Horse serumです。
分化させずに維持する場合は、DMEM+10% FBSを使っています。

どうぞよろしくお願いします。

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