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(無題) 削除/引用 No.2123-3 - 2008/10/17 (金) 16:27:09 - NF ~様、お返事遅くなりました。 漏れはあるものなのですね。情報ありがとうございます。 探した限り、horse serumのテトラサイクリンフリー製品は見つからなかったので、手始めに通常の血清で進めてみるつもりです。

(無題) 削除/引用 No.2123-2 - 2008/10/16 (木) 12:41:24 - ~ 3 お金がないラボにいたので、tet-onシステムを普通の血清で使っていました。 たまに入れている蛍光タンパク質が漏れている細胞が見えましたが、 薄播きしてコロニーを作らせるとコロニーごとに同じ位の発現量を示したので、 血清の問題ではなく、たまたま発現するようになってしまう細胞がいるのだと考えていました。 この系を使う目的は、doxによる誘導の有無によるなんらかの応答の違いを見ることがほとんどでしょうから、 漏れている微量なタンパク質によって違いが分からなくなるような系でもなければ、 漏れた細胞がいることは問題にならないと考えています。

Tet-on system、 特にserum関係 削除/引用 No.2123-1 - 2008/10/15 (水) 19:06:07 - NF いつも参考にしています。 現在、哺乳類細胞であるタンパク質を発現させようとしています。その際、Tet-on systemを使用しようと考えています。 そこで、経験者の方にお聞きしたいことがあります。 １、培養に関してhorse serumを使用しなくてはなりません。どなたか、horse serumのテトラサイクリンフリー製品をご存知の方おられますでしょうか？ ２、通常、テトラサイクリンフリーのFBSはTet-on system販売メーカーが取り扱っていると思うのですが、値段が高いのでは？と疑ってしまいます。そこで、どなたか経験者の方で、テトラサイクリンフリーのFBSの安いメーカーをご存知であれば教えていただきたいです。 ３、Tet-on systemではテトラサイクリンフリーの血清を使用するのですが、どなたか通常の血清で培養したときの発現の漏れを感じたからおられますでしょうか？通常の血清がどれほど影響するか知っておきたいので。 ４、その他、何か注意する点があればお教え願いたいです。 よろしくお願いします。

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