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ゲノミックサザンの方法(ES細胞のクローニング) トピック削除
No.2084-TOPIC - 2008/10/08 (水) 02:38:24 - ひろこ
こんにちは。
遺伝子ノックインのため、ES細胞の組換え体をスクリーニングしていますが、PCRがきちんと走らず、しかたなくサザンブロット法を用いることを考えています。そこで、フィルターに、Zeta-Probe GTを使用した場合、Radio-Hyb Bufferという予めミックスされたハイブリダイゼーション溶液を使用することはできるでしょうか。経験されたり、情報をお持ちの方がおられましたら、教えてください。よろしくお願いします。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.2084-5 - 2008/10/21 (火) 23:32:20 - ひろこ
KKKさん
アドバイスありがとうございました。その通りだと思いました。

まずは 削除/引用
No.2084-4 - 2008/10/14 (火) 23:00:01 - KKK
市販のものを使うならメーカに問い合わせてみるのも良いかもしれません。少なからず使用例はあるのかと思います

(無題) 削除/引用
No.2084-3 - 2008/10/10 (金) 19:28:26 - ひろこ
おおさん、ご返事ありがとうございました。
基本に戻って というご指摘は、その通りと思いました。そうすれば、私の疑問の解決にもつながるかも知れません。

(無題) 削除/引用
No.2084-2 - 2008/10/08 (水) 07:22:41 - おお
基本に戻って自分で作ってみればどうでしょう。
プロトコール集(しっかりとしたやつ)をみて、何が入っているとか、この検出系では
こっちが良いとか知識を得ることができますし、
そうすると、手持のプロッキングの試薬の中身が公開されていたら
これは使えるとか判断できるようになりますし。

最近は何でもきっとになってますから、マニュアル通りに混ぜるだけになりがちで
実験系を理解するきっかけを失っている人もおおいのではとちょっと不安に
おもいます。

あなたが研究助手ぐらいであれば、それでも構わないかもしれませんが。

ゲノミックサザンの方法(ES細胞のクローニング) 削除/引用
No.2084-1 - 2008/10/08 (水) 02:38:24 - ひろこ
こんにちは。
遺伝子ノックインのため、ES細胞の組換え体をスクリーニングしていますが、PCRがきちんと走らず、しかたなくサザンブロット法を用いることを考えています。そこで、フィルターに、Zeta-Probe GTを使用した場合、Radio-Hyb Bufferという予めミックスされたハイブリダイゼーション溶液を使用することはできるでしょうか。経験されたり、情報をお持ちの方がおられましたら、教えてください。よろしくお願いします。

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