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(無題) 削除/引用 No.2058-8 - 2008/10/07 (火) 08:32:15 - sall オープンカラムでの精製を厳密にやりたいのであればBIORAD社の「EGP エコノグラジェントポンプ」あたりがオススメです。 リニアグラジエントや数段階のステップワイズな溶出を再現よく出来ます。 若干値段は張りますが･･･

(無題) 削除/引用 No.2058-7 - 2008/10/06 (月) 15:59:42 - A 既に担体を購入されてしまっているようですがペリスタポンプ があり、カラムに乗せるタンパク質量がそれほどおおきくないので あればHiTrapのプレパックカラムを使うのも手ではいかと思います。 確かポンプがあるだけでもうまくやればそれなりに塩濃度の グラディエントがかけられたように思いますし。溶出条件がわかれば りょうさんがおっしゃっているようなステップワイズでも問題ないと 思います。

(無題) 削除/引用 No.2058-6 - 2008/10/05 (日) 19:20:36 - おお もうしてきがありますが、簡易カラムは売っています。さがせば多分アズワンとかみたいなカタログにもあるかもしれません。代理店にこんなカラムないってきいてもいいもではとおもいます。でそのゲルを自分で詰めてもつかえると思いますよ。ただHigh Performanceなのでたぶん(私の記憶が正しいか自身がないのですが)極めの細かいげるで、高い分解能を出せるようになっているとおもいますし、そういうゲルはその能力を発揮させるためにはしっかりと詰めた方がいいとおもいますが、あなたの実験でどこまで必要なのかで詰め方にどれくらい気を使うかは変わってくるかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.2058-5 - 2008/10/05 (日) 17:36:25 - りょう 樹脂を簡易カラム（ガラス製の物もあればBio-Radから販売されているpoly-prep Cat.No.731-1550のような使い捨てのものもあります)にピペットで詰めて、ぺリスタポンプでゆっくり引いて使用することも可能です。 FPLC,HPLCなどのシステムを使用すればグラジエントなどの機能が使えて解析方法にバリエーションが出るでしょうが、オープンカラムでのステップワイズでも綺麗に分画できます。

(無題) 削除/引用 No.2058-4 - 2008/10/05 (日) 16:58:03 - マカロン 銅羅さま ご指摘ありがとうございます。陽イオン交換というのは、さすがに承知していたはずなのですが、思いっきり寝ぼけて書き込みしておりました。申し訳ありません。 おお様 回答いただき、ありがとうございます。ゲルの詰め方は、何かシステムを使うというよりは、オープンカラムに自分でピペットで自然流速の中、つめていこうと思いますが、宜しいでしょうか？カラムサイズもそんなに大きくないので。SP Sepharose High Performance（HP）というゲルのみを購入しました。 精製時や洗いは、ペリスタポンプを使う予定です。

(無題) 削除/引用 No.2058-3 - 2008/10/05 (日) 08:59:37 - おお GEのシステムをつかうのであれば(AKTAでしたっけ)コネクションと、圧力でリークしたりはずれたりしないかということが問題なだけだとおもいます。あとは粒子が細かくなるほどそれにおうじた ぶんかいのうを発揮させるための詰めかたが難しくなってきます。 何かポンプのついた、システムを使うのですか、それともオープンカラムとかペリスターポンプでやるのでしょうか。 GEにかぎりませんがFPLCように売っているゲルはゲルだけでもうっているので、ゲルを買って詰めている人もいると思います。

(無題) 削除/引用 No.2058-2 - 2008/10/05 (日) 08:33:34 - 銅羅 そもそもSPは陽イオン交換体です。

イオン交換クロマト 削除/引用 No.2058-1 - 2008/10/05 (日) 07:19:23 - マカロン 最近、カラム精製（陰イオン交換クロマト）をするように言われまして、ＧＥさんのSP Sepharose High Performanceの担体のみを購入したのですが、専用のカラムも購入しないとダメなのでしょうか？ むかーーーし、カラム精製をした時は、樹脂を脱気して、自分で綿をつめたガラス？の筒のカラムに入れていたので、他の樹脂のものでも、同じカラム容器を使っていて、専用のものではなかったと思ったのですが・・。 今は、操作が楽なように専用カラムが売っているだけで、普通のカラムに自分でつめてもいいのでしょうか？ もし、ご存知の方みえましたら、アドバイスいただけると嬉しいです。宜しくお願い致します。

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