全12件 ( 1 〜 12 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.2055-12 - 2008/10/07 (火) 03:25:28 - ぽすどく >抗原の配列を明示しなくてはならない、というのは本当でしょうか? 抗原は分かっていても配列まで明らかな抗体は多くないと思いますが。 N末の20残基、というかなり特定された（気がする）書き方でもダメだとすると困ってしまいます。もしよかったら雑誌名を教えて下さい。 　雑誌名はJournal of Comparative Neurologyです。実は私自身が投稿したわけではないので、詳細を完全に覚えているわけではありません。ただ、原則として「抗原の配列を明示」となっていたのは間違いありません。それが不可能でも、「KOマウスをネガコンとして使えばOK」だったと思います。また、「WBでシングルバンドならOK」だったかもしれません。 　上記雑誌が厳しいのは、形態学の雑誌で、組織染色がメインデータになるためです。 >HSV-TK抗体、使ったことがあります。M. Blackさんのポリクローナル抗体、SCBTのポリクローナル、共に使用したことがあります。前者は非常にタイターが高く、良い抗体でした（もらうのは結構大変です）。SCBTのものはタイターこそそれほど高くなかったものの、ごく一般的なウェスタンで使えましたよ。ただ、SCBTのものはgoat polyclonalですので注意が必要です（二次抗体はanti goat）。 　実際に使われたとのこと。貴重な情報ありがとうございました。

使ったことあります 削除/引用 No.2055-11 - 2008/10/07 (火) 02:52:05 - CaP 抗原の配列を明示しなくてはならない、というのは本当でしょうか? 抗原は分かっていても配列まで明らかな抗体は多くないと思いますが。 N末の20残基、というかなり特定された（気がする）書き方でもダメだとすると困ってしまいます。もしよかったら雑誌名を教えて下さい。 あ、脇道にそれてしまいました。 HSV-TK抗体、使ったことがあります。M. Blackさんのポリクローナル抗体、SCBTのポリクローナル、共に使用したことがあります。前者は非常にタイターが高く、良い抗体でした（もらうのは結構大変です）。SCBTのものはタイターこそそれほど高くなかったものの、ごく一般的なウェスタンで使えましたよ。ただ、SCBTのものはgoat polyclonalですので注意が必要です（二次抗体はanti goat）。

(無題) 削除/引用 No.2055-10 - 2008/10/06 (月) 07:59:52 - おお >[Re:9] ぽすどくさんは書きました : > >質に問題があるというのは微妙で線引きができませんよね、、、、特異性も何おもって、特異性というか、、 > > 　意味がよくわからなかったのですが、おそらく、WBのことを頭に置かれているのでしょう。実は、私は組織染色を頭に入れていました。なので少し理解に時間がかかりました。 いや、WBなのかIHなのかIPなのかを考慮することで変わってくるということをいいたかったのです。 また、使い方もリコンビナント(マンマルのタンパクを大腸菌でとか)の精製や、リコンビナント同士の結合をみるとかだた、マンマルのライセートでバックグランドが出てもあまり問題がないでしょうし、 あとファミリー、を形成するプロテインは複数のタンパクが検出できるのをうまく利用できるでしょうし、いまはゲノムプロジェクトでたいていのファミリーを推測できますが、作った抗体が、目的のバンド以外をWBで認識して、そこから新しい相同性の高いファミリーがみつかったとかいうのもあります。 たしかに抗原部位をしっかり書いててほしいのですが、結構モノクロでたんぱく質全体で免疫してとれたと書かれていて、どこを認識するのか分からない抗体もありますね。

(無題) 削除/引用 No.2055-9 - 2008/10/06 (月) 00:16:09 - ぽすどく >質に問題があるというのは微妙で線引きができませんよね、、、、特異性も何おもって、特異性というか、、 　意味がよくわからなかったのですが、おそらく、WBのことを頭に置かれているのでしょう。実は、私は組織染色を頭に入れていました。なので少し理解に時間がかかりました。 　おっしゃるとおり「質に問題がある」という言葉はあいまいですね。使用方法によって異なるでしょうから。 　WBであれば、たとえバンドが何本あろうと（つまり特異性が低かろうと）抗体を使用可能かもしれません。しかし、私は組織染色が念頭にあったので、特異性に特別にこだわりました。（WBでバンドが２本出る＝質が低い） 　ただ、元々私が話題にしたHSV-TKは、野生型のマウスにはない（トランスジェニックにある）ので、コントロールをとりやすく、このことはあまり考えすぎなくてもよいのですが。

(無題) 削除/引用 No.2055-8 - 2008/10/05 (日) 21:32:49 - おお >[Re:7] ぽすどくさんは書きました : > 　特定の会社のことを言っているわけではありませんが、質に問題のある抗体を売っている会社と、（それを知りつつ？）特異性を確かめずに論文を書くケースは（ようやく？）問題視されてきているようです。 質に問題があるというのは微妙で線引きができませんよね、、、、特異性も何おもって、特異性というか、、

どこまで書いてよいものか 削除/引用 No.2055-7 - 2008/10/05 (日) 21:05:11 - ぽすどく 　いまは訴訟大国にいることもあり、あまり突っ込んだ意見を書くことはいたしませんが・・・・・・。 　最近とあるジャーナルの投稿規程が変更になり、抗原の配列をM&Mに書くことが原則として必要になりました。これに従うと、「N末端付近の２０残基を抗原とした」抗体を使用した論文は通らないことになります。 　特定の会社のことを言っているわけではありませんが、質に問題のある抗体を売っている会社と、（それを知りつつ？）特異性を確かめずに論文を書くケースは（ようやく？）問題視されてきているようです。

(無題) 削除/引用 No.2055-6 - 2008/10/05 (日) 12:15:13 - 横から 失礼します。 前から思っていたのですがscbtはどうして評判が悪いのでしょうか？ 確かに私が購入したＡｂのほとんどはノンスペと思われるバンドしか検出されませんでした。 クレームを付けて、別ロットや、別クローンで試してもだめでした。 ＫＯマウスがいるので、それで正確なネガコンをおいています。 なぜ〇ンタ●ルズはそんな抗体を売るのでしょうか？ もちろんサンタには非常に素晴らしい抗体があるのも事実です。 ただハズレが多すぎる…まあ、外れた抗体を買ってしまった自分が下調べ不足だったのが一番悪いですが。 どうして自社の評判を損なうようなことをしてしまうのでしょうかね。 全然関係ないレスですみません、みなさんのご意見が聞きたいです。 トピ主さんスミマセン（汗）

(無題) 削除/引用 No.2055-5 - 2008/10/05 (日) 10:46:54 - ぽすどく 　・・・例の会社ですね。大変参考になりました。上司と話してみようと思います。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2055-4 - 2008/10/05 (日) 03:37:17 - おお http://www.scbt.com/table.php?table=hsv%20protein ここで売っているようです。 使用したことはありません。

(無題) 削除/引用 No.2055-3 - 2008/10/04 (土) 23:20:50 - ぽすどく 　・・・もらったところや、私と同様にそこからもらった人に聞くのは一つの有効な手ですね。 　とりあえず、ここでの反応を見てからしようかと思います。少々考えすぎかもしれませんが、「うちの抗体の方がいいのになんで、コマーシャルのものを・・・。貴重な抗体を上げたのにもう使い切ったのか・・・。」と思われたりする可能性が０ではないので。 　実は、抗体を２年前にもらったときはコマーシャルのものは存在しませんでした（と思います）。ごくごく最近に発売されていないかなー、と期待しての投稿です。（できれば使用体験談も、などと欲張っています）

(無題) 削除/引用 No.2055-2 - 2008/10/04 (土) 14:46:54 - ami 作った研究室に聞いては、、、

HSV-TK抗体を探しています 削除/引用 No.2055-1 - 2008/10/04 (土) 06:37:33 - ぽすどく 　HSV-TK抗体を探しています。 　論文を探すと、出所は２つの研究室（手作り）に絞られ、実際にそのうちの一つからいただくことが出来ました。（２年ほど前の話です） 　いろいろと使いたいので、できればコマーシャルのものが欲しいところなのです。もしご存知の方がいたら、教えていただけましたら幸いです。

全12件 ( 1 〜 12 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---