全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

ありがとうございます。 削除/引用 No.2026-3 - 2008/09/29 (月) 23:04:12 - OKARA おおさん、ありがとうございます。 早速実施します。 また、何かありましたらご指導願えればと思います。 本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2026-2 - 2008/09/29 (月) 01:55:08 - おお 接着している細胞がいるなら、バイチが入っている状態でスクレーパーで処理(完全な浮遊系の場合は省略) 遠心で細胞を回収(800g-、5minくらい) PBSであらいもう一度遠心 Lysis bufferを添加し、なるべく均一になるように撹拌し氷上にて静置 sonication cfg(15000rpm x5min) 上澄回収 でいいかなとおもいます。

浮遊・半浮遊細胞の処置方法 削除/引用 No.2026-1 - 2008/09/28 (日) 20:57:32 - OKARA 皆様 私は、Western blotting初心者です。 今回は、皆様に細胞の処置方法について教えていただきたいと思いMail致しました。 実は、今度浮遊・半浮遊細胞をLysis bufferにて処置をしてWestern blottingをすることになりました。接着細胞は実施した事はあるのですが、浮遊・半浮遊細胞の処置の方法が分からず困っています。 どなたかご存知の方が居りましたらご指導の方お願いします。 因みに接着細胞を処置する際に使用しているCell Lysis bufferの組成は、 ・Cell lysis buffer　10x(Cell signaling) ・Potein kinase inhibitor cocktail1 ・Protein kinase inhibitor cocktail2 ・7x EDTA free soltution ・DMSF ・H2O です。 また、接着細胞の処置は以下の通りに実施しています。 1：Medium除去後、cold PBSにてwashing（x2） 2：Lysis bufferを添加し、氷上にて静置 3：スクレイパーにて回収 4：sonication 5:cfg(15000rpm x5min) 6:上澄回収 です。

全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---