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凍結保存細胞の有効年数は? トピック削除
No.1968-TOPIC - 2008/09/16 (火) 18:30:44 - cell
血清+DMSOやセルバンカーなどを用いて作製した細胞を
液体窒素タンク中で保管した場合、
どの程度の年数までならば
有効に使用できる状態を維持できるものでしょうか。

細胞種によって異なることは承知していますが、
例えば15年、20年を経ても大丈夫な細胞は大丈夫なのか、
それとも、どのような細胞であっても生存率は徐々に低下し
長期に亘って保管し続けるのは
単に場所の無駄使いになるだけなのでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.1968-3 - 2008/09/17 (水) 09:39:53 - ats
液体窒素タンクの整理のため、20年前のstockを起こしたことがあります。
生存率は低いものが多かったです。もっとも細胞密度が低く凍結した時点で生存率が低かった可能性が高いと思っています。また10%FBS-10%DMSO-80%培地を利用していたらしく、多くのサンプルはフェノールレッドの色が鮮やかな赤紫になって(炭酸ガスが抜けてややアルカリ性に偏って)いました。培地を使う場合は、pH変化しないように、シールする、もしくはHEPESを添加した方が良いかもしれませんね。
本当の長期に保存するには、細胞バンクで行っているようにガラスアンプルに封入し液体窒素が浸けるのがbestでしょう。
なお、10cm dish一枚分をセルバンカー1mLに懸濁しクライオチューブにいれ-80℃保存した癌細胞は、5年後でもほとんど生存率の低下はみられませんでした。ただし、-80℃ドア近くの箱の中の細胞はいまいちでした。おそらく温度変化によるものと考えられます。注意しましょう。

(無題) 削除/引用
No.1968-2 - 2008/09/16 (火) 23:02:12 - おお
株化した細胞では特に弱い細胞でなければ半永久的だと思ってます。
流石に50年、100年保存しておいた例は聞きませんが、、、、

凍結保存細胞の有効年数は? 削除/引用
No.1968-1 - 2008/09/16 (火) 18:30:44 - cell
血清+DMSOやセルバンカーなどを用いて作製した細胞を
液体窒素タンク中で保管した場合、
どの程度の年数までならば
有効に使用できる状態を維持できるものでしょうか。

細胞種によって異なることは承知していますが、
例えば15年、20年を経ても大丈夫な細胞は大丈夫なのか、
それとも、どのような細胞であっても生存率は徐々に低下し
長期に亘って保管し続けるのは
単に場所の無駄使いになるだけなのでしょうか。

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