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細胞増殖や細胞毒性をしらべる試薬
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No.1929-TOPIC - 2008/09/10 (水) 15:29:14 - つん
WST-1やWST-8法のかわりとなるようなもので、細胞増殖や細胞毒性を簡単に調べる方法を探しています。
何かよい試薬、キット、プロトコルなどをご存知でしたら教えてください。
・蛍光色素で検出するもの
・ミトコンドリアの機能に依存しない系
・操作が簡単で、サンプル数が多くなっても大丈夫なもの
を希望しています。
自分でも調べているところですが、いろいろあって迷っています。
アドバイスをお願いします。
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ありがとうございます
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No.1929-6 - 2008/09/18 (木) 11:16:42 - つん
返事が遅くなってしまって申し訳ありません。
おお様、TX様、通りすがり様、ご回答ありがとうございます。
自分でもいろいろと調べてみた結果、
TX様に教えていただいたmultitox-fluor multiplex cytotoxicity assay、
wakoの核酸量を測定する試薬、
同仁のcell counting kit F、
の三つに候補を絞りました。
あとは上司に判断をゆだねます。
(無題)
削除/引用
No.1929-5 - 2008/09/16 (火) 19:03:42 - 通りすがり
私の経験的には、LDH漏出を測定する系がミトコンドリアの影響を受けずに、かつ操作が簡単(と言ってもWSTに比べると簡単ではないですが...)で、しかもデータのばらつきが小さくなります。
ただし、LDH漏出では細胞毒性は見れますが、細胞増殖は見れません。
また、プレート上への細胞の播き数を均一にする必要があります。
あとはプロメガのATP assayでしょうか(これは発光になります)?
(無題)
削除/引用
No.1929-4 - 2008/09/12 (金) 20:56:03 - TX
promegaのprometech journal 2008 no25 p6-14に記載されている
multitox-fluor multiplex cytotoxicity assayが使えそうですよ。
参考にしてください。
http://www.promega.co.jp/Cre_Html.php?pGMPID=1430001
http://www.promega.co.jp/jp/prometec_J/pdf/pj25/PJ_No25-3.pdf
(無題)
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No.1929-2 - 2008/09/11 (木) 07:07:43 -
おお
DAPIとかでDNA量を蛍光で測れば細胞増殖をかなり反映した値になると思います。
アネキシンVで染色するとか、細胞死の検出系は毒性の検出に使えるかもしれませんね。
細胞増殖や細胞毒性をしらべる試薬
削除/引用
No.1929-1 - 2008/09/10 (水) 15:29:14 - つん
WST-1やWST-8法のかわりとなるようなもので、細胞増殖や細胞毒性を簡単に調べる方法を探しています。
何かよい試薬、キット、プロトコルなどをご存知でしたら教えてください。
・蛍光色素で検出するもの
・ミトコンドリアの機能に依存しない系
・操作が簡単で、サンプル数が多くなっても大丈夫なもの
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