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ゼラチンザイモグラフィーのバンドについて トピック削除
No.1861-TOPIC - 2008/09/01 (月) 02:39:48 - こねこ
MMP2、MMP9の活性をゼラチンザイモグラフィーで検出しています。

マーカーをのせているのですが、いまいちどれが活性化している
MMP2、9なのか、どれがプロエンザイムなのかが分かりません。。

分子量マーカーを使って、一応大体の分子量の予想はつくのですが
全然関係ない所にマーカーが出てしまっていて・・

検体の方はきれいに2本、白抜きバンドが出ているのですが
一つは分子量的に活性型MMP9で間違えなさそうなのですが、
もう一本はMMP2なのかと思いきや分子量的にMMP2ではなさそうなのです。

検体は心筋で、正常のものでもMMP2が発現する事がわかっているので
MMP2現しないのはおかしいのです。

抗体の説明書には
MMP9proenzyme:92kDa
MMP2(activated form):62kDa
と書いてあるのですが、明らかにこの92kDaと62kDaの間にもマーカー(プロエンザイムとアクティブのようなバンド)のバンドが見えていて、ちょうどそこに検体のバンドが見えている状況です。

どなたか、MMP2についてご教授下されば幸いです。
 
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zymography 削除/引用
No.1861-3 - 2008/10/01 (水) 05:33:01 - Yuki
私もまだ始めたばかりの素人ですで大したことはいえませんが、controlとしてzymography standard (MMP2/MM9)を使ってみては如何でしょうか?Chemiconから出てたと思います。(ちょっと高かった気はしますが)また、MMP2に関してはproは72kdにでると思います。

(無題) 削除/引用
No.1861-2 - 2008/09/01 (月) 12:11:41 - a
これを参考にしてみてはいかがでしょう(登録すれば無料で購読できます)

http://www.biotechniques.com/default.asp?page=article_archive&subsection=article_display&year=2005&issue=1/1/2005&display=full&id=11200516

ゼラチンザイモグラフィーのバンドについて 削除/引用
No.1861-1 - 2008/09/01 (月) 02:39:48 - こねこ
MMP2、MMP9の活性をゼラチンザイモグラフィーで検出しています。

マーカーをのせているのですが、いまいちどれが活性化している
MMP2、9なのか、どれがプロエンザイムなのかが分かりません。。

分子量マーカーを使って、一応大体の分子量の予想はつくのですが
全然関係ない所にマーカーが出てしまっていて・・

検体の方はきれいに2本、白抜きバンドが出ているのですが
一つは分子量的に活性型MMP9で間違えなさそうなのですが、
もう一本はMMP2なのかと思いきや分子量的にMMP2ではなさそうなのです。

検体は心筋で、正常のものでもMMP2が発現する事がわかっているので
MMP2現しないのはおかしいのです。

抗体の説明書には
MMP9proenzyme:92kDa
MMP2(activated form):62kDa
と書いてあるのですが、明らかにこの92kDaと62kDaの間にもマーカー(プロエンザイムとアクティブのようなバンド)のバンドが見えていて、ちょうどそこに検体のバンドが見えている状況です。

どなたか、MMP2についてご教授下されば幸いです。

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