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PBS濃度について トピック削除
No.1841-TOPIC - 2008/08/28 (木) 14:05:06 - ma1230
初歩的な質問ですが、困っています。
NADH/NBT染色をする予定にしているのです。そこで、incubationに使用するmediumを作る際にPBSを入れることになっているのですが、論文では、1ml of phosphate-buffered saline(pH 7.4) at a concentration 2mg/mlと記載されています。そこで、PBSは0.1Mなどモル計算していますが、今回の濃度は2mg/mlと単位が変わっているし、PBS作成には何種類かが混じっているので、どれの濃度はわからないのです。
 mg/mlする方法など教えてください。
 
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これ? 削除/引用
No.1841-12 - 2008/09/01 (月) 12:37:31 - mom-a
APさんが見つけられたらしき論文(Google Scholarで1つだけヒットしたので多分同じものと…)では、下記のようになっています…。

Incubation media consists of 1mL of reduced a-NADH (Sigma-Aldrich Corp., St. Louis, MO) at a concentration of 2.5mg/mL distilled water, 1mL of phosphate-buffered saline (pH 7.4) at a concentration
of 2mg/mL, and 0.5mL of Ringer solution.

これが当たりでしたら…他に参考になる論文を探されては?

(無題) 削除/引用
No.1841-11 - 2008/09/01 (月) 12:18:02 - AP
phosphate buffered "saline"ですからね。それをsolidのプレミックスから作ったにしても、solidの状態ではsalineとはいわないでしょう(文法以前に英単語の問題)。あるとしたら溶液PBSを重さで2 mg量って1 mLにしたってことになりますが、そりゃないだろうというのは研究者であれば英語以前ではないでしょうか。

それはさておき、
Google Scholarで検索すると、一報だけそれらしいのがありました。
全文は読めなかったのでその部分だけですが、
>..... Louis, MO) at a concentration of 2.5mg/mL distilled water, 1mL of phosphate-buffered saline (pH 7.4) at a concentration of 2mg/mL, and 0.5mL of Ringer solution. Each tissue section slide is covered with 100 lL of incu- bation media for 15 minutes ...

もしこれがそれであれば(部分的なので想像で補うと)、何かの試薬を蒸留水に溶かしたもの、PBSに溶かしたもの、それとリンガー、3種類の溶液を並列して記述したもののようです(著者は名前からすると確かにnaiveではないらしいですが)。

(無題) 削除/引用
No.1841-10 - 2008/09/01 (月) 11:43:08 - TT
>PBSはタブレット状や粉末でも売ってるし。
>前後の文章がわからないけど、トピ主が抜粋した文章からはそう判断するね。
>英語の読解力ないんじゃない?

タブレットにしろ粉末にしろ、2mg/mlって濃すぎるのでその線はないかと。100xPBSよりも濃くなりそう。

(無題) 削除/引用
No.1841-9 - 2008/09/01 (月) 10:57:55 - IRES
前後の文章がわからないのだからなんともいえないのでは?
MMってreviewerもそれほどしっかり読まないし、Englishがnative speakerじゃない場合は単純に何かの間違いかもしれないですよね。その数単語が含まれている一文を抜粋して載せてください。

(無題) 削除/引用
No.1841-8 - 2008/09/01 (月) 10:41:08 - 平
おおさんの仰るとおりですよ。

oilioさんの言うような意味なら、at a concentrationとは言わないでしょ。

(無題) 削除/引用
No.1841-7 - 2008/08/30 (土) 23:42:03 - 名無し
モノをPBSにとかすか、モノが溶けたPBSをつくるか
つまり
NBT 2 mg を 1 ml の PBSに溶かしたものを用いる
もしくは
NBT 2 mg と 10 mM Phosphate 1 ml 相当の NaHPO4, 150 mM NaCl 1 ml 相当の NaCl を試験管に取って、pH 7.4 に調整して 1 ml にメスアップしたものを用いる
だと思います。

前者だと、NBTの体積の分だけ、PBSが(僅かながら)薄くなりますから厳密な意味でPBSではないと考えられます
後者は、厳密な意味でNBTがPBSに溶けています。

基質液なので、前者で問題ないと思いますが。

(無題) 削除/引用
No.1841-6 - 2008/08/30 (土) 18:22:59 - oilio
PBSはタブレット状や粉末でも売ってるし。

前後の文章がわからないけど、トピ主が抜粋した文章からはそう判断するね。
英語の読解力ないんじゃない?

(無題) 削除/引用
No.1841-5 - 2008/08/30 (土) 01:49:47 - おお
>[Re:2] おおさんは書きました :
> 1ml of phosphate-buffered saline(pH 7.4)
>
> 1mMの燐酸バッファー(pH7.4)で緩衝能力をもたせた、生理的食塩水

あ、mMでなくてmLですね。
1mMの燐酸バッファー(pH7.4)で緩衝能力をもたせた、生理的食塩水
->1mLのPBS

訂正しときます。
言いたかったことはAPさんのコメントとほぼ一緒です。

(無題) 削除/引用
No.1841-4 - 2008/08/30 (土) 00:25:51 - AP
なにか変なところで抜粋しているようです。
たとえば、
NBT was added in 1 mL PBS at a concentration of 2mg/mL とか、
XXX were stained with NBT in 1 mL PBS at a concentration of 2mg/mL
というような文になっていませんか?

2 mg/mLのPBSって意味がわからない。なんでPBSがmg単位で表現がされるわけ?

>PBSは0.1Mなどモル計算していますが、

PBSはリン酸バッファーと塩(NaCland/or KCl)との、ある一定濃度の混合組成なので、PBSの濃度をモル濃度表現することはなりません。基本のPBS濃度にたいして10倍なら10x PBS、1/2倍なら0.5x PBSなどと表します。
リン酸バッファー(phosphate buffer)と混同していませんか。リン酸バッファーなら0.1 M phosphate buffer (pH XX)という風にいいますが。

(無題) 削除/引用
No.1841-3 - 2008/08/29 (金) 22:57:57 - oilio
それはちょっとちがうんじゃないかな。

2mg/mlのPBS、1mLってことでしょ。

(無題) 削除/引用
No.1841-2 - 2008/08/28 (木) 14:27:21 - おお
1ml of phosphate-buffered saline(pH 7.4)

1mMの燐酸バッファー(pH7.4)で緩衝能力をもたせた、生理的食塩水

a concentration 2mg/ml

これは上記のバッファーを含む食塩水に何かを2mg/mlになるように溶解したのではないでしょうか。

PBS濃度について 削除/引用
No.1841-1 - 2008/08/28 (木) 14:05:06 - ma1230
初歩的な質問ですが、困っています。
NADH/NBT染色をする予定にしているのです。そこで、incubationに使用するmediumを作る際にPBSを入れることになっているのですが、論文では、1ml of phosphate-buffered saline(pH 7.4) at a concentration 2mg/mlと記載されています。そこで、PBSは0.1Mなどモル計算していますが、今回の濃度は2mg/mlと単位が変わっているし、PBS作成には何種類かが混じっているので、どれの濃度はわからないのです。
 mg/mlする方法など教えてください。

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