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PMBCの培養 トピック削除
No.1782-TOPIC - 2008/08/19 (火) 06:40:22 - PBMC
初めてヒトのPBMCを他ラボから頂き培養を行いました。
AIM-V mediumを使って3x10の6乗/mlでまきました。
6時間ほど培養すると細胞が凝集して塊のようになってしまいました。
頂いた先のラボの方にたずねたら、そういうことにはならない、と言われてしまいました。
細胞数が多すぎるわけでもない様なのですが、対処法などアドバイスをいただけないでしょうか?

やりたいこととしては、単純に薬剤を16時間処置するだけですので、一日培養できれば良いのですが。。。
 
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なるほど 削除/引用
No.1782-3 - 2008/08/19 (火) 23:47:14 - PBMC
起こしたときに半分くらいの細胞は死んでいるかも、と言われました。
遠心して取り除けるかと思いましたが、うまく行っていないのかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.1782-2 - 2008/08/19 (火) 11:28:29 - うーん
細胞が死んでいませんか?

死んだ細胞からDNAが出て来て、からまってしまい凝集を作ることはあると思います。

また血小板など上手く除けていない場合にはCa依存的に凝集体を作ります。


今回の場合、DNaseなどで処理してみるのもてかもしれないですね。

PMBCの培養 削除/引用
No.1782-1 - 2008/08/19 (火) 06:40:22 - PBMC
初めてヒトのPBMCを他ラボから頂き培養を行いました。
AIM-V mediumを使って3x10の6乗/mlでまきました。
6時間ほど培養すると細胞が凝集して塊のようになってしまいました。
頂いた先のラボの方にたずねたら、そういうことにはならない、と言われてしまいました。
細胞数が多すぎるわけでもない様なのですが、対処法などアドバイスをいただけないでしょうか?

やりたいこととしては、単純に薬剤を16時間処置するだけですので、一日培養できれば良いのですが。。。

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