全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.173-4 - 2007/09/11 (火) 15:55:45 - とも 空ベクターはGFPか何か入っているのですか？？ GaLVっていうエンブは初めて聞いたのですが、そのenvは宿主を選ばないんですよね？？ 濃縮には耐えられるenvなのですか？？ 293Tにトランスフェクションしたときにインサートの発現はちゃんとみられますか？？

(無題) 削除/引用 No.173-3 - 2007/09/11 (火) 14:27:27 - バイキンマン トランスフェクション効率は調べてみたのですが。リン酸カルシウムで100％とは言いませんが８割以上は入っています。 空ベクターではjurkatにも十分に感染しています（85％）。 jurkatは感染しにくいとも聞いたのですが･･･？ PG13はGaLVのenvです。

(無題) 削除/引用 No.173-2 - 2007/09/11 (火) 13:56:49 - とも PG13がパッケージング細胞って書いてあるのですが、レンチウイルスをつくるためのパッケージング細胞なのですか？？ リン酸カルシウムでトランスフェクションしたときに100％遺伝子導入されていますか？？ あとリン酸カルシウムでやるときはlow glucoseのメディウム使ってください。highのものを使うと細胞が死にました。(SIGMAのとき） Jurkatには濃縮せずに100%感染するはずです。 まずはトランスフェクションの方法を確立する必要がありそうですね。

レンチウイルス 削除/引用 No.173-1 - 2007/09/10 (月) 20:54:22 - バイキンマン pYKという、レンチウイルスベクター（10kb程）に3kb程のインサートを入れたベクターで、ウイルス感染をPG13というパッケージング細胞にさせたいのですが全く感染しません。1000倍に濃縮をしても無理でした。 ベクター 17μｇ、pMDLg/pRRE 12μg、VSV-G 5μg、pRSV-Rev 5μg/dishで293Tにリン酸カルシウムでトランスフェクションし、レンチウイルスを作りました。PG13ではなく、JURKATには、濃縮したウイルスで1.5％程だけ感染は見られました。それぞれのプラスミドの量や、トランスフェクションの方法（リポフェクションやFuGENEなど）、PG13がレンチに感染しずらいなどが問題なのでしょうか？ レンチウイルスを作る過程で何かいい方法を教えてください。また、PG13以外に良いパッケージング細胞があるのでしょうか？ 初心者なので、説明が足りなかったり、不明瞭であるかもしれませんが、宜しくお願いします。

全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---