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(無題) 削除/引用 No.1719-4 - 2008/08/06 (水) 00:02:13 - マチ 私も実際にラットの細胞（脾臓ではなくリンパ節ですが）とマウスミエローマでハイブリドーマを作っています。 ＤＮＡＩさんが仰る通りで、マウス脾臓を用いた場合でも抗体を産生しなくなるケースは多々ありますし、ラットでも同様です。 ２）についてはＤＮＡＩさんと同意見です。 １）ですが、ラットの脾臓を用いた場合、極端に安定性が悪いということは無いようですが、多少ラットでの抗体産生は安定性が悪いように感じました。そこで私はミエローマを色々と試してみたのですが、X63、NS-1よりもSp2/0のほうがハイブリドーマは安定して抗体を産生するものが多く得られました。 一概には言えませんが、単純に安定性だけで見るのであればミエローマを疑ってみるのも手かもしれません。 これは当然ですが、ハイブリドーマも株によって性質は様々ですので、拡大して何本かストックを作るまでは細胞密度を上げすぎない様に細心の注意を払って下さい。コンフル付近まで増やしてしまうと抗体産生に影響が出る場合が多くありますので。。

(無題) 削除/引用 No.1719-3 - 2008/08/05 (火) 17:36:40 - うんとね 昔同じような経験があって、IL-6とかが、いーっぱい入ったgrowth supplyを加えたら抗体産生も増殖能もあがったっ。 えーっと、その商品名は、というと… 　「ダイゴGF21」 だよっ！

(無題) 削除/引用 No.1719-2 - 2008/08/05 (火) 16:49:56 - ＤＮＡＩ ラットＢ細胞×マウスミエローマでも問題なくクローンは樹立できてますので、マウスラット間におけるハイブリドーマの安定性の差異はそれほど経験がありません。 しかし、マウスでもラットでもスケールアップやクローニング中に抗体産生能を失うケースは多々あります。 今回のラットモノクロは全てのクローンが抗体産生能を失っているのでしょうか？ また抗体産生能を失ったハイブリドーマの復活方法ですが、抗体遺伝子が脱落したハイブリドーマが優位に増えた結果、上清中の抗体濃度が低下したケースだと、出来るだけ初代（融合に近い）のストックを起してリクローニングすると復活できたことがあります。

ハイブリドーマから抗体産生が消失 削除/引用 No.1719-1 - 2008/08/05 (火) 16:31:26 - Acena Demina ラットに免疫後、マウス由来のミエローマ細胞と融合させてハイブリドーマを作製しています。セルロース培地でコロニーを形成後、96穴プレートに単離してスクリーニングにかけていますが、せっかく抗体を産生するハイブリドーマを見つけても、その後抗体産生が消失してしまいます。以前、マウスに免役して、同じミエローマ細胞で抗体を作製したときにはこのような現象は認められませんでした。そこで、教えていただきたいのですが、１）ラットの脾臓細胞とマウス由来のミエローマ細胞を融合させることはダメなのでしょうか？２）一度、抗体を産生しなくなったハイブリドーマをまた復活させるにはどのような方法があるのでしょうか？どなたか教えていただけますよう、よろしくお願いいたします。

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