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No.1715-TOPIC - 2008/08/05 (火) 11:04:32 - ポリサッカライド
いつも参考にさせて頂いています。
樹木からmRNAを酸性フェノクロを使って抽出してきているのですが、どうしても多糖が混入してきてしまいます。古い方、新しい方のトピックを参考にして0.8M Sodium citrate-1.2M NaClとイソプロ沈したり、LiCl沈したりしてそこそこ減らせるのですが、A280/260の値及びA260/230の値が2.2を超えてくるので多糖が除けていないようです。cDNAライブラリ構築のために逆転写する必要があるのですが、もっとpurityをあげたいと思っております。

多糖除去に関する手法について、これまでの掲示板での開示も合わせていろいろと教えて頂けないでしょうか。
 
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(無題) 削除/引用
No.1715-3 - 2008/08/05 (火) 16:40:28 - Pumpkin
4M NaOAcでペレットを洗うと多糖だけを溶解して洗浄できるというのをどこかで見ました。私自身は試したことないので、あくまで未確認情報ですが。試されたら是非結果を知りたいです。

(無題) 削除/引用
No.1715-2 - 2008/08/05 (火) 11:39:18 - 古老
こんなこともありましたじゃ。

http://www.kenkyuu.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;start=1;Code=784

ポリサッカライド 削除/引用
No.1715-1 - 2008/08/05 (火) 11:04:32 - ポリサッカライド
いつも参考にさせて頂いています。
樹木からmRNAを酸性フェノクロを使って抽出してきているのですが、どうしても多糖が混入してきてしまいます。古い方、新しい方のトピックを参考にして0.8M Sodium citrate-1.2M NaClとイソプロ沈したり、LiCl沈したりしてそこそこ減らせるのですが、A280/260の値及びA260/230の値が2.2を超えてくるので多糖が除けていないようです。cDNAライブラリ構築のために逆転写する必要があるのですが、もっとpurityをあげたいと思っております。

多糖除去に関する手法について、これまでの掲示板での開示も合わせていろいろと教えて頂けないでしょうか。

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