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精製したモノクロのグリセロールストックの仕方 トピック削除
No.1702-TOPIC - 2008/08/03 (日) 17:35:29 - モノクロ初心者
宜しくお願いいたします。

現在マウスモノクロIgG3を作成し、高タイターの腹水を回収しました。

Protein Aカラムを用いて精製し、PBSに対して透析を行いました。

蛋白濃度を測定して、約1mg/mlに出来ました。

続いて、グリセロールを加えて−40℃に保存したいのですが、終濃度でどれくらいのグリセロール溶液にすればいいのでしょうか?

また、防腐剤など加えるべきなのでしょうか?


というのも、2年ほど前に透析までしたものを4℃で置いていたら白い沈殿が
生じていました。簡単にボルテックスをしてFACSに用いるとちゃんと使えるのですが、今回、精製から透析を行ったあと、グリセロールをちゃんと加えたいと思っています。

どうか、ご教示ください。宜しくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1702-2 - 2008/08/05 (火) 15:15:54 - りょう
50%グリセロール、0.02-0.05%アジ化ナトリウムくらいですかね。

精製したモノクロのグリセロールストックの仕方 削除/引用
No.1702-1 - 2008/08/03 (日) 17:35:29 - モノクロ初心者
宜しくお願いいたします。

現在マウスモノクロIgG3を作成し、高タイターの腹水を回収しました。

Protein Aカラムを用いて精製し、PBSに対して透析を行いました。

蛋白濃度を測定して、約1mg/mlに出来ました。

続いて、グリセロールを加えて−40℃に保存したいのですが、終濃度でどれくらいのグリセロール溶液にすればいいのでしょうか?

また、防腐剤など加えるべきなのでしょうか?


というのも、2年ほど前に透析までしたものを4℃で置いていたら白い沈殿が
生じていました。簡単にボルテックスをしてFACSに用いるとちゃんと使えるのですが、今回、精製から透析を行ったあと、グリセロールをちゃんと加えたいと思っています。

どうか、ご教示ください。宜しくお願いいたします。

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