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(無題) 削除/引用 No.163-2 - 2007/09/10 (月) 14:17:23 - DNAI ターゲットタンパクが分泌後に膜へ接着している可能性はないですか。依然扱ったタンパクで、そういう事例がありました。 ＦＡＣＳで細胞表面を解析すれば一目瞭然かと思います。 細胞内に局在しているのであればこの考えは誤りですけど。 細胞内に局在している場合は、分泌シグナルを変更すると改善する可能性もあります。

分泌刺激 削除/引用 No.163-1 - 2007/09/07 (金) 19:57:45 - トモ N末に分泌シグナル配列をもつあるタンパク質を HEKにトランジェントで発現させ 培養上清から目的のタンパク質を精製したいと考えております。 培養上清を精製後、WBで確認したところ 目的タンパクは培養上清には分泌されていないようなのです。 cell lysateのWBの結果では、目的の位置にバンドが検出されているので transfection自体は上手く行っているようです。 そこでstimulationをかけて分泌をさせたいと思うのですが 一般的にどのような方法 (試薬等) があるのでしょうか？ 基本的な質問で申し訳ないのですが、宜しくお願いします。

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