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(無題) 削除/引用 No.1589-5 - 2008/07/17 (木) 23:13:56 - 免疫染色はじめてです。 TSさん なにから何まで本当にありがとうございます！！！ ぜひやってみます！！ ありがとうございました！！

うーんと 削除/引用 No.1589-4 - 2008/07/17 (木) 22:56:56 - TS 一般的にはたとえば、ベースは、90% glycerol in PBS(-)とかですね。glycerol濃度は、50%ぐらいまでで好みがあると思いますが。 蛍光免疫染色ですので、これに退色防止剤を加えた方が良いと思います。 DABCO,n-propyl gallateあたりがよく使われます。 自作するのであれば（自作で十分ですが）、このあたりをキーワードに少し調べてみたらいかがでしょうか？退色防止剤は、使用するDyeによって性能も違うようですから。 無駄に（？）高価ですが、市販のものも便利です。DAPI入りとかもあって、核染色もできるやつもありますし（まぁこれも作れますけど）。

(無題) 削除/引用 No.1589-3 - 2008/07/17 (木) 22:34:51 - 免疫染色はじめてです。 TSさん 本当にありがとうございます！！ 確かに7 mmは小さいですよね、ですが、コラーゲンが勿体ないということでこうなってしまいました。 封入試薬は何を用いるべきでしょうか？ マニキュアはあります！ どうか教えて頂けますでしょうか、宜しくお願い致します。

マニキュアです。 削除/引用 No.1589-2 - 2008/07/17 (木) 22:20:49 - TS 封入試薬をスライドグラスに一滴垂らし、空気が入らないようにカバーグラスを置きます。余分な封入試薬があればふきとり、マニキュアで周りを固めましょう。マニキュアは結構多めに使うか、二度塗りするとはがれにくくなります。透明なやつがおすすめです。 でも７mmって小さいですね。十分な視野が確保できると良いですけど。

免疫染色でカバーガラスをスライドガラスに固定する方法 削除/引用 No.1589-1 - 2008/07/17 (木) 21:47:02 - 免疫染色はじめてです。 FACSで細胞を染色したことはこれまで何度もあるのですが、今回、細胞内の抗原も見てみようと思い、初めて免疫染色をやろうと考えています。 正立の蛍光顕微鏡がありますので7 mm四方のカバーガラスのようなものにType１コラーゲンをコートしました。 そこに細胞を乗せて明日染色をしようと思っています。 ここで、質問です。 大変初歩的な質問ですみません。 明日、細胞の乗ったカバーガラスを固定液、0.05 % Triton X液、Blocking buffer液にポチャンと浸けたあと、一次抗体、それから蛍光標識二次抗体で染色後、見てみる予定です。 ここで質問ですが、この7 mm四方のカバーガラスを「スライドガラス」に固定させますよね？ これってどうやってやるのですか？ 本当に初歩的な質問ですみません。全く分かりません。 どうか教えて頂けないでしょうか、宜しくお願い致します。

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