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(無題) 削除/引用 No.1566-2 - 2008/07/17 (木) 14:44:22 - fish 培養細胞と、肝臓でNAD+含量をHPLCにて測定したことがあります。 J Biol Chem. 2004 Dec 3;279(49):50754-63. Epub 2004 Sep 20. の方法で行いました。 培養細胞では問題ありませんが、組織での測定にはポイントがあります。 除タンパクに過塩素酸を用いて行いますが、過塩素酸中で組織の破砕をsonicationで行うとnoiseが非常に高くなるということです。 過塩素酸中に組織を入れて、解剖用のハサミでミンスする程度で十分破砕されているようで、既報どおりのvalueがでて、positive controlもworkしました。 NADHは測定したことがありません。 参考になれば。。

NAD/NADH比測定 削除/引用 No.1566-1 - 2008/07/15 (火) 15:55:34 - sk 培養細胞内あるいはマウス腎臓抽出液におけるNAD+、NADH濃度、NAD/NADH比を測定したいと思っております。 HPLCを用いて検討したいと思っていますが、今までに施行したことがありません。過去の報告をみているとNADはHCLにて、NADHはNaOHにて回収するようなことが書かれてあるのですが、実際に抽出、HPLCによる検討をされた方がおられましたらその方法、Bufferなど教えてください。

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