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皆様ありがとうございます 削除/引用 No.1540-4 - 2008/07/12 (土) 14:56:09 - 新米大学院生 ご返答が遅れてもうしわけありません。 皆様、素早いレスありがとうございます。 >まうすさん 細胞毒性も低いのは、お得ですね。 ボスの言うとおり、やはりPEI法を試す価値はありそうですね。 >atsさん 詳しい方法まで教えていただきありがとうございます。 コストパフォーマンスが、I社のものと比べて 全然違いそうですね。

Polyethylenimine “Max” 削除/引用 No.1540-3 - 2008/07/11 (金) 17:27:30 - ats Linear PEIの方がbranched PEIより導入効率は良好です。 HEK293でのluciferaseの発現はFuGENE6より高い結果が得られました。 毒性も観察されず、ただしpromoter干渉実験で影響が見られたので、FuGENE6より何らのストレスは与えるようです。わたしは組換えウィルスやタンパクの発現にもっぱら使っています。 Polyethylenimine “Max” 2g \22000ほど（有り余る量の溶液が調製できます） http://www.polysciences.com/Catalog/Department/Product/98/categoryId__283/productId__1960/ http://www.pnas.org/cgi/content/full/102/16/5679 使用法　35mm dish (1) 2ug DNA/ HBSS 100uL + 1mg/mL PEI-Max 4uL (2) Vortex immediately (three times, 3 sec each) (3) Incubate the mixture for 15 min at room temperature (4) Add DNA/PEI soln to cells in the growth medium. 10cm dishなら　12ug DNA /600uL + 24uL PEI-Max 細胞によって、量比を変えると効率が上がるかも。

PEI transfection 削除/引用 No.1540-2 - 2008/07/11 (金) 12:57:02 - まうす 私はPEIを使って培養細胞への遺伝子導入を行っています。今のところ、293, 293T, NIH3T3, HeLa, primary MEF等に効率良く遺伝子導入出来ています。既製品のトランスフェクション試薬はここのところ購入していません。 DNAとPEIの量の比率を、細胞によって細かく条件検討すれば、I社の試薬よりも低い細胞毒性かつ高い導入効率でトランスフェクション出来ますよ。 以下のページに細かいprotocolが載っていますので、参考にしてください。 http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/protocols;2008/4/pdb.prot4978

ポリエチレンイミン(PEI)を使ったトランスフェクション 削除/引用 No.1540-1 - 2008/07/11 (金) 11:05:53 - 新米大学院生 うちの研究室の先生が、PEIを使って細胞にトランスフェクト できるらしいぞ！と言ってきました。 なんか既製品の試薬(I社)より格段に安くできるらしいのです。 誰か、培養細胞のトランスフェクションにPEIを使用している人いますか？ いたら、いい試薬の調整法やトランスフェクションの際の プロトコルを教えていただけたら幸いです。 よろしくお願いします。

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