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(無題) 削除/引用 No.1528-3 - 2008/07/10 (木) 17:38:40 - furufuru 1ステップキットの使用用途（インビトロジェン）には、遺伝子発現の検出などと書かれているので、遺伝子発現の検出に用いられるのが主なのでしょうかね。サンプル数が多いと2ステップは大変だろうし。あと、ほとんどがTaqのみを増幅に用いてるのが多いので、クローニングはいかがなものかと思っていました。 確かに、クローニングの場合、条件検討を要することが多いし、ポリメラーゼ検討もできるので、2ステップの方がいいですね。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.1528-2 - 2008/07/10 (木) 10:09:03 - ~ 私も１ステップの利点やどのような場面で使用されるのかを聞きたいです。 １ステップは使ったことがないのですが、 チューブ１本で反応するのがメリットで、 PCRの条件がおかしくて増えなかった場合、 またチューブ１本使って、RTから反応するのですよね。 ２ステップだと、 RTかけた後のサンプルを小分けして、複数回PCRできるし、 DNAポリメラーゼや温度やプライマーの条件も検討できるので、 クローニング目的ならば、２ステップの方がいいのでは？ １ステップでRTの後で止めて、 別のチューブに分けてPCRするのであれば、２ステップと同じになるので、 クローニングについて利点が分かりません。

1ステップ 2ステップ どちらRT-PCR 削除/引用 No.1528-1 - 2008/07/10 (木) 09:47:29 - furufuru RT-PCRには1ステップと2ステップの2種類ありますが、どのような使い分けをしていますか。遺伝子クローニングの場合はどちらがおすすめでしょうか。

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