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(無題) 削除/引用 No.1503-3 - 2008/07/07 (月) 20:20:36 - りょう 防腐剤は入れる必要あるのでしょうか？ それが悪さをしている可能性は？ NGF刺激後何日継続培養されているのでしょうか？ この手の実験は数多く論文あるでしょうが、あなたが今回やられている方法はスタンダードなのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.1503-2 - 2008/07/07 (月) 20:04:38 - うーんと ２から３へ急にいくのはいいのですか？ 素人的には通常の境内培地で培養後、刺激を入れる前に数時間、nutrition deprivationの期間があれば、NGFへの反応性は期待できそうな気もするのですが。

PC12の基礎 削除/引用 No.1503-1 - 2008/07/07 (月) 19:49:25 - 巨人ファン PC12を初めて使っています。 DMEM+5% heat-activated FBS+1% HBSに適当量のペニシリンを入れたものを増殖用培地として利用しております。 継代は全く問題なく、普通に増えていきます。 そこで、突起伸長速度を測定しようと思い、PC12を下記の条件下で培養しはじめました。 １．Fibronectinでdishをコーティング ２．培養密度を1*10^(5) cells/mLで培養3日間、上記の増殖用培地にて培養 ３．DMEM+1% HBS+適当な防腐剤の培地1mLあたり、5ug程度のNGFに切り替える ところが、増殖は止まりましたが、密度が薄いのか、微妙な突起が伸びるだけです。 何か問題、改善点などありましたら、教えて下さい。

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