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Lipopolysaccharide(LPS)の保存について トピック削除
No.1500-TOPIC - 2008/07/07 (月) 12:29:39 - 初心者
はじめまして
いつも勉強させていただいております。

実験でLipopolysaccharide(LPS)O55:B5を使うことになりました。
1mg/mlに溶解し、残りを保存したいのですが、
どのように保存するのがベストか、教えていただけますか?

小分けにして、凍結保存したほうが良いのか、4℃保存が良いのか、
凍結の場合は-80度か−20度か悩んでいます。

文献ではLPS stockを−70℃で保存と書いているのですが、
そのstockがどういう状態なのかが(液体なのか・現物なのかなど)
わからず、-80度にしてLPSがだめにならないか心配です。

-80、-20でもよいのか、
どれくらいの期間保存できるのか、など、

教えていただけると嬉しいです。

よろしくお願いします。
 
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ありがとうございました 解決済み 削除/引用
No.1500-6 - 2008/07/08 (火) 10:42:51 - 初心者
アドバイスをしてくださった皆様、本当にありがとうございます。。
とても勉強になりました。
小分けにして、-20度に冷凍してみます。

(無題) 削除/引用
No.1500-4 - 2008/07/07 (月) 17:22:33 - ひまわり
LPSはもっぱら細胞にしか使っていませんが、1mg/mLのstock solutionを100uLずつ分注し、-20℃で保存しております。
当方では余ったものは捨てずに取っておいて次の実験に使用しています。
これまで問題なく再現性の高い実験ができています。
2年ぐらい前に調製したLPSを使ったことがありますが、こちらも問題ありませんでした。

(無題) 削除/引用
No.1500-3 - 2008/07/07 (月) 13:45:41 - まっくろん
 私の所属先では、salineで溶かす前は4˚C、溶かしてからは小分けにして冷凍(-40˚C)で保存していました。濃度は1-5mg/mlでした。LPSは多糖体でオートクレーブでも分解できないと聞いたことがあるので、数ヶ月は4˚Cでも大丈夫なような気がします。また繰り返しの凍結融解はタンパクなどに比べれば耐性があるのかもしれませんが、自分たちは一度溶かしたものは、廃棄するようにしていました。開封後、4˚C保存の粉末LPSは、湿気ないよう乾燥剤を用いて保存しています。参考になれば幸いです。

(無題) 削除/引用
No.1500-2 - 2008/07/07 (月) 12:46:53 - LPS
僕も初心者さんと同じものを使っています。

僕はめんどくさがりやで、LPSの粉末をsalineで1mg/mlに溶かしたら小分けにして4℃においてます。結構安定で3-4ヶ月までは安定的に実験をできました。それ以上は試してはいません。

ひとつchemical biologyの方にお話を伺ったところ、なるべく高い濃度で希釈しないことを注意されました。

僕はネズミに高用量のLPSを打つため前日に10 mg/mlで希釈して調製した物を4℃で保存していて、翌日来たら沈殿していました。

どうも高濃度だとミセルを作ってしまうようなんです。

ですので、その沈殿していたLPSをvoltex後にマウスに打ってもピンピンしてました。

注意することはそれぐらいじゃないでしょか。

4℃でも随分と安定ですよ。

Lipopolysaccharide(LPS)の保存について 削除/引用
No.1500-1 - 2008/07/07 (月) 12:29:39 - 初心者
はじめまして
いつも勉強させていただいております。

実験でLipopolysaccharide(LPS)O55:B5を使うことになりました。
1mg/mlに溶解し、残りを保存したいのですが、
どのように保存するのがベストか、教えていただけますか?

小分けにして、凍結保存したほうが良いのか、4℃保存が良いのか、
凍結の場合は-80度か−20度か悩んでいます。

文献ではLPS stockを−70℃で保存と書いているのですが、
そのstockがどういう状態なのかが(液体なのか・現物なのかなど)
わからず、-80度にしてLPSがだめにならないか心配です。

-80、-20でもよいのか、
どれくらいの期間保存できるのか、など、

教えていただけると嬉しいです。

よろしくお願いします。

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