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BCIP/NBTの色が茶色くなる原因
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No.15-TOPIC - 2007/07/31 (火) 19:16:12 - 発色
in situ hybridizationの検出で、BCIP/NBTシグナルが青くならず、褐色調になることがあります。
褐色になるのは、ターゲットの組織発現量が低い、あるいはプローブが短い
場合です。
今のところ原因として、組織上のAP酵素(抗体)密度によって、色調が変わるのではないかと考えています。
同じような経験がある、あるいは発現量が少なくてもきちんと青くなる、という方がおられましたら、教えてください。
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No.15-2 - 2007/08/01 (水) 19:42:39 - Muscle
ナイロンメンブレンを使って、プローブテストを行いました。
Rocheのキットに含まれるControl DIG Labeled RNAも、作成したDIG Labeld cRNAも赤紫色していました。
発色さんのおっしゃるように
「組織上のAP酵素(抗体)密度」で色調が変わるような気がします。
また、NBT/BCIPの質も大きく関わっているような気もします。
この色の違いは気持ちが悪いので、事実が明らかになってほしいですね。
BCIP/NBTの色が茶色くなる原因
削除/引用
No.15-1 - 2007/07/31 (火) 19:16:12 - 発色
in situ hybridizationの検出で、BCIP/NBTシグナルが青くならず、褐色調になることがあります。
褐色になるのは、ターゲットの組織発現量が低い、あるいはプローブが短い
場合です。
今のところ原因として、組織上のAP酵素(抗体)密度によって、色調が変わるのではないかと考えています。
同じような経験がある、あるいは発現量が少なくてもきちんと青くなる、という方がおられましたら、教えてください。
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