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免疫染色 トピック削除
No.1487-TOPIC - 2008/07/04 (金) 08:46:52 - じん
度々書き込みすみません。

免疫染色で、1次抗体滴下後、通常4℃でover night だと思うんですが、
4℃で2〜3日置いてても、大丈夫でしょうか?結果はやはり変わるものでしょうか?

どなたか教えてください!!
 
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なんとかなりそうです 解決済み 削除/引用
No.1487-6 - 2008/07/04 (金) 11:18:42 - じん
お返事ありがとうございます。

土日にラボに来る人を見つけて、依頼できました。

お騒がせしました。

http://www.iam.u-tokyo.ac.jp/bnsikato/protocol/4-10.htmlを拝見させてもらいました。確かに3日間処理もできるようですね・・。

もし次にこのようなことが起こったら、試してみようと思います。

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.1487-5 - 2008/07/04 (金) 09:54:46 - ~
抗原賦活化後であれば、
PBSなどにつけておくか、ブロッキングし続けるかでしょうか。

出張であれば、だれか土日に来る人に依頼できませんかね。

http://www.iam.u-tokyo.ac.jp/bnsikato/protocol/4-10.html
では3日間一次抗体で処理することもできるようなので、
一次抗体で月曜まで処理してみてもいいのかもしれませんね。

(無題) 削除/引用
No.1487-4 - 2008/07/04 (金) 09:26:32 - AP
抗体がくっつくのは特異的反応、交差反応、非特異的吸着も、平たくいうと反応速度が違うだけであって、交差反応や非特異的吸着も時間が長くなれば上がっててきます。時間が過剰になればS/Nが悪くなってきます。
同じ結果を反応時間の長くしてを得ようとしたら、抗体の希釈率を上げるとか、あらためて最適化をする必要があるでしょう。

(無題) 削除/引用
No.1487-3 - 2008/07/04 (金) 09:17:57 - じん
書き込みありがとうございます。

当方の材料はパラフィン切片なのですが、結果に影響なんてわからないですよね・・・。

急遽、出張が入りまして、土日ラボに行けなくなってしまい・・・(+o+)

それを知ったのは抗原賦活化後のこと・・・。

(無題) 削除/引用
No.1487-2 - 2008/07/04 (金) 09:06:05 - ~
材料や条件にもよるのでしょうけれども、
長時間のインキュベートによる乾燥や非特異反応などが、
絶対に結果に影響しないとは誰もいえないでしょう。

土日休みたいのでしたら、月曜から仕事を始めましょう。

免疫染色 削除/引用
No.1487-1 - 2008/07/04 (金) 08:46:52 - じん
度々書き込みすみません。

免疫染色で、1次抗体滴下後、通常4℃でover night だと思うんですが、
4℃で2〜3日置いてても、大丈夫でしょうか?結果はやはり変わるものでしょうか?

どなたか教えてください!!

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