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TB培地 トピック削除
No.1438-TOPIC - 2008/06/26 (木) 22:10:34 - Tn
本日初めて大腸菌培養用にTB培地(Terrific Broth)を作製したのですが、材料を溶かした後、培地をオートクレーブにかけたら、培地が濁ってしまいました。
TB培地というのはこういうものなのでしょうか。

ちなみ組成は下記の通りです。
トリプトン       12g
イーストエクストラクト 24g
K2HPO4         9.4g  
KH2PO4         2.2g
グリセロール      8ml
         up to 1L

今までTB培地の現物を見たことがないので、判断がつけられません。単純な質問で申し訳ありませんが、教えていただけないでしょうか。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.1438-6 - 2008/06/27 (金) 00:26:54 - Tn
みなさま

ありがとうございます。本当に助かります。
皆様の御助言を参考に早速作り直してみます。

ちなみに私のレシピはシグマのものを参考にいたしました。
一応リンクを貼っておきます。

http://www.sigma-aldrich.co.jp/cgi-bin/protocol/p_dsp.cgi?pid=5

このたびは本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.1438-5 - 2008/06/26 (木) 23:11:11 - Pumpkin
モレクロでは、APさんのレシピですね。Tnさんのグリセロール8mlはモディファイですか?

(無題) 削除/引用
No.1438-4 - 2008/06/26 (木) 22:51:10 - AP
リン酸とペプチドが反応して難溶性の物質が出来るためではないでしょうか。
リン酸塩を100 mL水溶液、それ以外を900 mLの水溶液にして、それぞれオートクレーブをかけて冷ましてから混ぜ合わせて作ります。

ちょっと手ものとレシピと違っているところがあるのですが、私のでは
K2HPO4         12.54 g (0.72 M)
KH2PO4         2.31 g (0.17 M)
(これらは、使っている試薬の水和水数の違いでしょうかね)
glycerol 4mL

となっています。

(無題) 削除/引用
No.1438-3 - 2008/06/26 (木) 22:37:35 - ##
リン酸バッファーは10xのものを作製して別々にオートクレーブし、後で混ぜ合わせてください。
あと、TB(リン酸(-))はオートクレーブ後、茶色になりますがそのまま使えます。

(無題) 削除/引用
No.1438-2 - 2008/06/26 (木) 22:25:26 - TB
リン酸バッファ
K2HPO4         9.4g  
KH2PO4         2.2g
は、
別で作成してオートクレーブして、
後で入れるはずですよ。

TB培地 削除/引用
No.1438-1 - 2008/06/26 (木) 22:10:34 - Tn
本日初めて大腸菌培養用にTB培地(Terrific Broth)を作製したのですが、材料を溶かした後、培地をオートクレーブにかけたら、培地が濁ってしまいました。
TB培地というのはこういうものなのでしょうか。

ちなみ組成は下記の通りです。
トリプトン       12g
イーストエクストラクト 24g
K2HPO4         9.4g  
KH2PO4         2.2g
グリセロール      8ml
         up to 1L

今までTB培地の現物を見たことがないので、判断がつけられません。単純な質問で申し訳ありませんが、教えていただけないでしょうか。

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