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SDS-PAGEの2-メルカプトエタノール トピック削除
No.1364-TOPIC - 2008/06/18 (水) 17:33:45 - 新米
SDS-PAGEのときに,5%の2-メルカプトエタノール(2ME)を電気泳動するサンプルに混ぜて,SS結合を開裂させるとありまますが,用いる2MEの量が大過剰量,例えば5倍であった場合,タンパク質の泳動パターンはどうなりますか?また,そのゲルを使って,ウェスタンブロットすると,キチンと出来ますか?(開裂するのに必要以上の2MEが入っていれば,問題ない気もするのですが・・・
 
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(無題) 削除/引用
No.1364-3 - 2008/06/18 (水) 19:32:37 - L
DTTだと問題でしょうが、2-MEは問題にならないと思います。
臭さが増すかもしれませんが…

(無題) 削除/引用
No.1364-2 - 2008/06/18 (水) 19:23:43 - ami
5倍はあまり試みたことがありませんが、2倍とか3倍くらいだと特に問題ありません。なんとなく、Sample Bufferを2倍で使ってみたりはします。

SDS-PAGEの2-メルカプトエタノール 削除/引用
No.1364-1 - 2008/06/18 (水) 17:33:45 - 新米
SDS-PAGEのときに,5%の2-メルカプトエタノール(2ME)を電気泳動するサンプルに混ぜて,SS結合を開裂させるとありまますが,用いる2MEの量が大過剰量,例えば5倍であった場合,タンパク質の泳動パターンはどうなりますか?また,そのゲルを使って,ウェスタンブロットすると,キチンと出来ますか?(開裂するのに必要以上の2MEが入っていれば,問題ない気もするのですが・・・

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