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TakaraのDNA Ligation Kit (Mighty Mix) トピック削除
No.1225-TOPIC - 2008/05/30 (金) 21:53:12 - 貧乏研究者
何時もお世話になっております。

TaKaRaのDNA ligation Kit(Mighty Mix)を使用していますが、このキットはどの程度の期間使用できるでしょうか。ここ1年ぐらい、クローニングを行っていなかったので、キット自体は購入後2年半ぐらい経っています。ちなみに1年前には使用できていました(効率は調べていませんが)。今回はリンカーライゲーションを行う予定です。

使用経験のある方で情報をいただければ有り難いのですが。宜しくお願いいたします。すいません。貧乏なんです。
 
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(無題) 削除/引用
No.1225-4 - 2008/05/31 (土) 12:57:33 - AP
適当なDNA断片(例えばlambda HindIIIとか、制限酵素で線状化したプラスミドでもいいです)でligationのテストをして、重合が起こっているかどうかを電気泳動で確かめてみたらいいと思います。
その手のキットなら室温30分くらいで、元の断片が完全になくなり非常に高分子のバンドが見えると思います。

TakaraのDNA Ligation Kit (Mighty Mix) 削除/引用
No.1225-3 - 2008/05/31 (土) 12:16:35 - 貧乏研究者
Pumpkinさん

お返事どうもありがとうございます。
私も経験的にそう思っているので使用してきましたが、さすがに
不安になってきました。メーカーに聞くと、”だいたい1年を目安に・・・”
といっとりました。目安って・・・。

ほかに情報をお持ちの方がおられましたら、ご教授ください。
よろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.1225-2 - 2008/05/30 (金) 22:09:30 - Pumpkin
なんとも言えませんが、この手のキットは割かし強いように感じます(経験的にで、根拠はありませんが)。凍結融解にも非常に強いので、むしろ使わずに-20℃で寝ていたのであれば平気かもしれません。リンカーも一回分しかないというのなら、無理には薦めませんが。

TakaraのDNA Ligation Kit (Mighty Mix) 削除/引用
No.1225-1 - 2008/05/30 (金) 21:53:12 - 貧乏研究者
何時もお世話になっております。

TaKaRaのDNA ligation Kit(Mighty Mix)を使用していますが、このキットはどの程度の期間使用できるでしょうか。ここ1年ぐらい、クローニングを行っていなかったので、キット自体は購入後2年半ぐらい経っています。ちなみに1年前には使用できていました(効率は調べていませんが)。今回はリンカーライゲーションを行う予定です。

使用経験のある方で情報をいただければ有り難いのですが。宜しくお願いいたします。すいません。貧乏なんです。

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