ショウジョウバエの初期胚を用いてホールマウントによる免疫染色を始めたばかりです。
私が行っている方法は、
１ 胚が入ったWash液から上清を除き、60％グリセロールでけん濁する
２ 胚を沈殿させる
３ 60％グリセロールをスライドガラスに薄く塗る
４ 先を切ったチップを用いて胚を回収（グリセロール液も一緒に）
スライドガラスに乗せる
５ 観察しやすいように複数の島に分ける
６ カバーガラスを乗せる
７ マニキュアで封をする です。
このプロトコールのうち、
液体の持ち込みが多くてうまく９つの島に分けられない ことと
カバーガラスをかけたときに高頻度で空気が入ってしまう
ことに悩んでいます。
何か上手に行く方法やコツをお持ちの方がいらっしゃいましたら、
ご教授いただけると嬉しいです。
よろしくお願いいたします。 |
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