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銀染色したゲルをTransferできますか
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No.1153-TOPIC - 2008/05/18 (日) 12:08:11 -
ami
お世話になります。
銀染色したゲルを、Wet SystemでTransferして、Western Blotに用いることはできますか。
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No.1153-4 - 2008/05/20 (火) 10:42:12 - さとし
Wise GE, Lin F.
Transfer of silver-stained proteins from polyacrylamide gels to polyvinylidene difluoride membranes.
J Biochem Biophys Methods. 1991 Apr;22(3):223-31.
PMID: 1713931
これでは?
(無題)
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No.1153-3 - 2008/05/18 (日) 17:12:23 -
qqq
知っていることは、
1)フェリシアン化カリウムとチオ硫酸ナトリウムで染色された銀を脱色することができます。(
http://www.shiga-med.ac.jp/~hqmicro/protocol/
)
2)脱色液程度で固定化したゲルを、SDS-PAGEの泳動緩衝液で30分インキュベートすると、そこそこ転写することができます。
両方を一緒にやったことはありませんが、可能かもしれません。
問題点は、銀染色の増感操作で、グルタルアルデヒドやホルムアルデヒドを使っているはずです。少なくとも、グルタルアルデヒドを使用しない銀染色を行う必要があります。
その気になって、うまくいったら教えてください。
(無題)
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No.1153-2 - 2008/05/18 (日) 12:30:23 -
おお
かなりトランスファーされにくくなっていると思いますので、難しいと思います。
銀染色したゲルをTransferできますか
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No.1153-1 - 2008/05/18 (日) 12:08:11 -
ami
お世話になります。
銀染色したゲルを、Wet SystemでTransferして、Western Blotに用いることはできますか。
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