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ノーザンブロットの非放射性検出キットの実際 トピック削除
No.110-TOPIC - 2007/08/25 (土) 16:23:26 - まさ
バクテリア中の目的遺伝子がオペロンを形成していることの確認のため、
初めてノーザンブロット行おうとしているものです。

Rocheなどから様々な非放射性ラベルによる検出キットが出てますが、
お勧めのメーカーなどがあったら教えていただけないでしょうか?

コストよりは時間や検出感度を重要視しております。
RI標識は利用しない予定です。
 
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(無題) 削除/引用
No.110-2 - 2007/08/28 (火) 11:31:18 - chi
GEバイオヘルス?(旧アマシャム)のアルカリフォスダイレクトラベリングキット

ロシュのDIGと違って抗体使わないので楽チン。

ただ、シグナルを可視化する時に、蛍光検出的なことが出来る機械があるか
(CCDカメラとか)X線フィルムに現像するとかしないとだめだった気がします。
私は手現像でやってました。露光O/Nとかかかったけど、そんなに嫌になるほどの作業ではありません。
カメラあれば数十分〜数時間後の蛍光のピークがおとずれればすぐ見れる。

DIGは膜状にそのまま青くバンドが検出できる方法があります。数十分〜数時間ででました。

ノーザンブロットの非放射性検出キットの実際 削除/引用
No.110-1 - 2007/08/25 (土) 16:23:26 - まさ
バクテリア中の目的遺伝子がオペロンを形成していることの確認のため、
初めてノーザンブロット行おうとしているものです。

Rocheなどから様々な非放射性ラベルによる検出キットが出てますが、
お勧めのメーカーなどがあったら教えていただけないでしょうか?

コストよりは時間や検出感度を重要視しております。
RI標識は利用しない予定です。

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