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ありがとうございました 削除/引用 No.1093-7 - 2008/05/12 (月) 09:46:01 - ダメ助 Aさん、SIさん、貴重な情報ありがとうございました。 まずは100%エタノールに溶解して、現在効果をチェック中です。 みなさま、本当に助かりました。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.1093-6 - 2008/05/09 (金) 15:51:29 - SI 僕は100%エタノールに溶かし、-20℃で保存していました。ご参考までに。

(無題) 削除/引用 No.1093-5 - 2008/05/09 (金) 13:00:25 - A もう一点追加ですが、無理してNEMを使う必要もないのでiodoacetamideであれば水溶性なので、うちではこれを0.5Mにして、分注して使い捨てにしています。効果はSHをつぶすのであればNEMと変わりません。

(無題) 削除/引用 No.1093-4 - 2008/05/09 (金) 11:06:54 - ダメ助 ご指摘ありがとうございます。 メーカーのプロダクトシートを読んだのですが、 ストック溶液の条件を見つけることができませんでした。 Aさんのおっしゃるように、DMSOに溶解して実験を行ってみます。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.1093-3 - 2008/05/08 (木) 19:24:17 - A 水溶液を60度で加熱するといくらなんでも分解するんじゃないですかね。手間を惜しまず、フレッシュに、DMSOに1Mになるように溶かして、lysateに加えるのがベストです。DMSO溶液はストックできるような気がしますが、一般論として、その場合は分注して、凍結融解は避けた方が良いでしょうね。

(無題) 削除/引用 No.1093-2 - 2008/05/08 (木) 14:10:20 - NEM 造ってるとこに聞いてみるのがいいと思います。

Nエチルマレイミドについて 削除/引用 No.1093-1 - 2008/05/07 (水) 15:12:14 - ダメ助 どなたかご存知の方、教えていただけると助かります。 現在、培養細胞からタンパク質を抽出し、Nエチルマレイミドを加えたいのですが、その方法が良く分かりません。 滅菌水にNエチルマレイミド粉末を0.5Mとなるように加え、60℃くらいに加熱して溶解した液をストックとして用いています。 これを細胞のlysisバッファーに20mMとなるように加えて、細胞を溶解しているのですが、うまく効果が現れていないようです。 Nエチルマレイミドのストック溶液の作り方や、添加方法などご存知の方がいらっしゃいましたら教えいただけますでしょうか？ よろしくお願いいたします。

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