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抗体作製を受託で・・・ トピック削除
No.1072-TOPIC - 2008/05/01 (木) 17:52:54 - koutai
是非教えてもらいたいことがあり、書き込みしました。

抗体作製のために試行錯誤して、遂に抗原となるタンパク質を十分量得られるというところまで辿り着き、抗体作製に現実味が帯びてきました。

獲得しようとしている抗体は、ウサギを用いたポリクローナル抗体です。

ちなみに、抗原は、大腸菌により発現させた封入体タンパク質をSDS-PAGEにアプライして、ゲル抽出したものです。
さらにゲル抽出物はSDSやCBBを除去します。


そこで、抗体作製は受託して済ませたいと考えています。
ウサギの面倒や抗体価の測定などの手間を考えて・・・
抗体作製中に、封入体リフォールディングなどの検討をしたいですし・・・

抗体作製は初めてで、
さらに、周りに抗体作製を経験した人が少ないので、なかなか有効なアドバイスが得られません。


抗体作製を受託した方にお聞きしたいのですが、
『受託した会社』に加えて、「ここは安かった!」とか「ここは信用できる!」とか体験談を教えて頂きたいと思います。
安かったといっても、曖昧ですが・・・よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1072-5 - 2008/05/01 (木) 22:40:12 - koutai
kさん
オクタロニー法を用いて、チェックする予定です。

これを用いれば、抗体価を調べると同時に、
類似のタンパク質や、
異なる生物種から獲得した、私が扱っているものと同じタンパク質との反応性もチェックできますし・・・

ダメでしょうか・・・

(無題) 削除/引用
No.1072-4 - 2008/05/01 (木) 21:27:53 -
どのようにチェックするのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.1072-3 - 2008/05/01 (木) 19:01:42 - koutai
> あと外注したとしても、抗体価のassayはふつう自分でやるのではないでしょうか?
勿論、外注したものが出来上がって受け取った時には抗体価はチェックします。

(無題) 削除/引用
No.1072-2 - 2008/05/01 (木) 18:10:45 - 名無し
電気泳動後のゲルを使う場合、SDSとかCBBとかそんな一生懸命除かなくてもいいのではないでしょうか。ゲルごとすり潰して注射する人もいるくらいですから問題ないと思います。むしろ既製ゲルなどを使い、ケラチンなどのきょう雑蛋白質をできるだけ入らないようにするのが重要でしょう。

あと外注したとしても、抗体価のassayはふつう自分でやるのではないでしょうか?

抗体作製を受託で・・・ 削除/引用
No.1072-1 - 2008/05/01 (木) 17:52:54 - koutai
是非教えてもらいたいことがあり、書き込みしました。

抗体作製のために試行錯誤して、遂に抗原となるタンパク質を十分量得られるというところまで辿り着き、抗体作製に現実味が帯びてきました。

獲得しようとしている抗体は、ウサギを用いたポリクローナル抗体です。

ちなみに、抗原は、大腸菌により発現させた封入体タンパク質をSDS-PAGEにアプライして、ゲル抽出したものです。
さらにゲル抽出物はSDSやCBBを除去します。


そこで、抗体作製は受託して済ませたいと考えています。
ウサギの面倒や抗体価の測定などの手間を考えて・・・
抗体作製中に、封入体リフォールディングなどの検討をしたいですし・・・

抗体作製は初めてで、
さらに、周りに抗体作製を経験した人が少ないので、なかなか有効なアドバイスが得られません。


抗体作製を受託した方にお聞きしたいのですが、
『受託した会社』に加えて、「ここは安かった!」とか「ここは信用できる!」とか体験談を教えて頂きたいと思います。
安かったといっても、曖昧ですが・・・よろしくお願いします。

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