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マクロファージ染色
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No.1008-TOPIC - 2008/04/21 (月) 15:33:06 -
ma1230
今、マウスの肝臓のKupper cellを代表をするマクロファージを免疫染色しているのですが、マクロファージの核を染める抗体はないでしょうか?目的としては、マクロファージの二重染色をするのに細胞質が染まるものは決まっているのですが、他、核を染めるものがほしいのです。
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(無題)
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No.1008-6 - 2008/04/22 (火) 17:22:32 - よっしー
連続切片で同一細胞であることを示すのは,
不可能じゃないかもしれませんがどうでしょう???
目的によるでしょうね.
私も昔はGr1,HE,mac1を連続切片で染色してましたが,
この細胞が多い,少ない(何%程度)ということは言えても,
同一細胞であることは言いにくいと思います.
(無題)
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No.1008-5 - 2008/04/22 (火) 15:31:07 -
ma1230
IFのことはまったくわかっていないのですが、ご意見からすると、IFの二重染色で確認すればよいということですね。それと、連続切片を使用してNF-κBとf4/80を別々に染めることをして確認するのも可能でしょうか?
(無題)
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No.1008-4 - 2008/04/21 (月) 19:03:29 - よっしー
蛍光で2重染色すれば細胞質と細胞膜であっても,
同一細胞かどうかは確認できると思います.
しかしながら,F4/80は単球にも反応するので,
血液中の単球にも反応すると思います.
(無題)
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No.1008-3 - 2008/04/21 (月) 18:34:02 -
ma1230
早々のご回答ありがとうございます。
目的はNF-κBがMφで染まっていることを知りたいのです。マウス肝臓のKupper cellでNF-κBが細胞質で染まっていることを確認しました。ただ、還流固定で抜けきれない血球成分にもNF-κBが染まるのでF4/80で染めようと思ったのですが、NF-κBとF4/80の二重染色ではF4/80が表面マーカーなので染まる部分がダブってしまうのでがという懸念があるのです。NF-κBがKupper cellに染まっていることを伝えるのはどうしたらよいでしょうか?
(無題)
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No.1008-2 - 2008/04/21 (月) 16:58:49 - よっしー
目的が良く分からないですが,マクロファージの核のみを
選択的に染色することは不可能だと思います.
DAPIやPIあるいはヘマトキシリンなどですべての核を染色し,
マクロファージに対する抗体を用いて
マクロファージを染色するのではダメなのでしょうか?
マクロファージ染色
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No.1008-1 - 2008/04/21 (月) 15:33:06 -
ma1230
今、マウスの肝臓のKupper cellを代表をするマクロファージを免疫染色しているのですが、マクロファージの核を染める抗体はないでしょうか?目的としては、マクロファージの二重染色をするのに細胞質が染まるものは決まっているのですが、他、核を染めるものがほしいのです。
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