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細胞破砕(ソニケーション)について
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No.4608-TOPIC - 2007/07/25 (水) 01:02:46 -
エアロ
ソニケーションの強度はどのように決めればよいのでしょうか。ちなみに私はrange Highでon/off=30秒/30秒で10分程やっています。特に強すぎとか長すぎということはないでしょうか?また、大量培養したあとの菌体が5g程ある場合もっと時間を長くしなければいけないのでしょうか。しっかり細胞が破砕できているのかどうかも目ではよくわかりません。破砕のしすぎが目的蛋白質の分解に影響してしまわないかどうかというのも心配です。
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No.4608-3 - 2007/07/25 (水) 13:01:13 -
エアロ
ありがとうございます。
使っているのはコスモバイオのUCD-200TMというもので、lange がLOW,MIDDLE,HIGHと3種類から選択できるようになっています。
同じラボの方は1ℓで培養した菌体をlange HIGHでon/off=30secで30minも
やったらしいのですが全然平気だったとの話も聞きました。
(無題)
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No.4608-2 - 2007/07/25 (水) 07:31:01 - 〜
とりあえず、過去ログを読むと分かりますが、
ソニケーションは機械とその設定が同じでもやり方で結果が変わってきますので、
何の機械かわからない条件を書かれても、強さや長さについては分かりません。
個人的には長いような気はしますが、
回収できていれば問題ないと思います。
どうやって決めるかは、条件検討して決めます。
その中には、目的のタンパク質の回収量も含まれます。
("率"はオリジナルの条件がないと分かりません)
細胞破砕(ソニケーション)について
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No.4608-1 - 2007/07/25 (水) 01:02:46 -
エアロ
ソニケーションの強度はどのように決めればよいのでしょうか。ちなみに私はrange Highでon/off=30秒/30秒で10分程やっています。特に強すぎとか長すぎということはないでしょうか?また、大量培養したあとの菌体が5g程ある場合もっと時間を長くしなければいけないのでしょうか。しっかり細胞が破砕できているのかどうかも目ではよくわかりません。破砕のしすぎが目的蛋白質の分解に影響してしまわないかどうかというのも心配です。
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