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(無題) 削除/引用 No.4598-2 - 2007/07/24 (火) 21:39:15 - K さしつかえなければ、MMさんの使用されているプロトコールを 書いてくださると、「ここがポイントでは」というお話ができる かと思います。 トリプシンの使用量が文字化けしてしまっているのですが、20マイクロリットルということでしょうか？

消化 削除/引用 No.4598-1 - 2007/07/24 (火) 13:51:54 - MM MALDIを使っていて　うまくいっていないので相談させてください。 ゲル内消化の際に、トリプシンを２０µｌいれて 氷中で２０分静置後　Trisバッファーを加えて ３７℃で一晩反応させているのですが 測定でシグナルが検出できません。 ためしにBSA溶液を消化してみると　シグナルは見られるので　 ゲル内消化がいけないのかと思うのでが・・ CBB染色の組成が悪い、 トリプシンが不足していて切断できていなくて　ゲルから出てこない、 抽出液量の不足、 など考えては見るのですが ゲルからうまく抽出できない場合はどういったことが 対策として考えられるのでしょうか。 ゲル内消化を実施なさっている方々で 経験談等も含めて　ご教授いただけましたら　 よろしくお願いします。

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