ラット脳からmRNAを抽出し、マイクロアレイで遺伝子発現を解析したいと考えているのですが、脳はRNAse活性が高く、摘出行程におけるmRNAの劣化が早いため、アレイ解析に用いるための質の良いmRNAを抽出するのに苦労しております。
ラット脳からのmRNA抽出の経験がある方がいらっしゃいましたら、以下の点についてご助言いただけないでしょうか?
(1) 迅速な脳の摘出の仕方
(2) 脳摘出時におけるmRNAの劣化を防ぐための方法
(3) 脳摘出後の処置(摘出後の処置、最適な凍結方法など)
脳摘出後は、できれば薄くスライスし、特的の脳部位(扁桃体)を切り出してmRNAの抽出をしたいと考えています。これについてもご助言を頂けたら幸いです。 |
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