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リアルタイムPCRのインターカレーター トピック削除
No.4576-TOPIC - 2007/07/20 (金) 23:01:54 - PCR初心者
原理についての質問なのですが、お答えいただけたら幸いです。

リアルタイムPCRの検出でインターカレーターを使用する方法について疑問があるのですが、インターカレーターは合成された2本鎖DNAに結合し、励起光の照射により蛍光を発しますよね。
PCRだと合成された2本鎖DNAはすぐ1本鎖になるのだから先に発せられた蛍光はなくなってしまわないのですか?
各ステップがが10secごとくらいでまわるためすぐ新たな蛍光ができるから減少は見られず、蛍光の増加が検出されていくということなのでしょうか。

初歩的な質問ですみません。
 
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(無題) 削除/引用
No.4576-2 - 2007/07/22 (日) 19:41:03 - う〜んと
装置の測定プログラムを見れば判ることですが、ずーっと測定してるわけではなくて、1サイクルに1度しか測定しません。

リアルタイムPCRのインターカレーター 削除/引用
No.4576-1 - 2007/07/20 (金) 23:01:54 - PCR初心者
原理についての質問なのですが、お答えいただけたら幸いです。

リアルタイムPCRの検出でインターカレーターを使用する方法について疑問があるのですが、インターカレーターは合成された2本鎖DNAに結合し、励起光の照射により蛍光を発しますよね。
PCRだと合成された2本鎖DNAはすぐ1本鎖になるのだから先に発せられた蛍光はなくなってしまわないのですか?
各ステップがが10secごとくらいでまわるためすぐ新たな蛍光ができるから減少は見られず、蛍光の増加が検出されていくということなのでしょうか。

初歩的な質問ですみません。

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