Bio Technical フォーラム

  • 書き込みがかなり増えてしまいサーバーの負荷が大きくなったので、新しいBioTechnicalフォーラムに移行してください。
  • 新しいトピックは新フォーラムでのみ立ち上げ可能です。レスもつけられません。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | この次のフォーラム(readのみ) | このフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

FISHの蛍光シグナルを消すには トピック削除
No.4537-TOPIC - 2007/07/12 (木) 17:13:30 - nekoneko
2種類のプローブで同一の細胞をFISHしようとしています。
プローブAで観察したあと、シグナルを消してプローブBで観察するには、どうしたら良いでしょうか?

いままで、温度を上げたり、Phを極端(4や10)にしたり、UVを当てたり、しましたが、完全に消すことができません。

A、Bを異なる色で標識して見る方法は、分析が複雑になるので、なんとか、2回に分けたいのですが。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.4537-3 - 2007/07/13 (金) 11:02:27 - nekoneko
お返事ありがとうございます。

2種類のプローブと書きましたが、
1つにターゲット遺伝子とインターナルコントロールのαサテライトが入っています。
つまり2種類にすると4色になり、これに遺伝子増幅があると、かなり分析が難しい状況になると考えています。将来3種類になる可能性もあります。

フォトブリーチングは個々の細胞に5分ほど蛍光顕微鏡でUVを当てれば消えるのですが、細胞が数百個あるので、なかなか大変です。

そこで、殺菌灯に1時間さらしたりもしましたが、殆ど減衰しませんでした。

いままで、蛍光を弱めないように、気を使ってきましたが、いざ完全に簡単に消したいとなると、てこずっている始末です。

(無題) 削除/引用
No.4537-2 - 2007/07/13 (金) 08:46:27 - 〜
前にFITCとPEをレーザー共焦点で見たときに、
FITCはすぐに退色したことがあります。
なので、フォトブリーチングは出来ませんか?

ただ、前のFITCが完全に消えることを示すよりも、
2色の方が簡単なような気がします。

FISHの蛍光シグナルを消すには 削除/引用
No.4537-1 - 2007/07/12 (木) 17:13:30 - nekoneko
2種類のプローブで同一の細胞をFISHしようとしています。
プローブAで観察したあと、シグナルを消してプローブBで観察するには、どうしたら良いでしょうか?

いままで、温度を上げたり、Phを極端(4や10)にしたり、UVを当てたり、しましたが、完全に消すことができません。

A、Bを異なる色で標識して見る方法は、分析が複雑になるので、なんとか、2回に分けたいのですが。

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。